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原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)是以肝内小胆管炎症、破坏为特征的慢性、进行性胆汁淤积性的自身免疫性肝脏疾病。虽然具体发病原因不清楚,但与免疫因素密切相关,广泛的单核／巨噬细胞浸润及CD4+T细胞异常活化是PBC中小胆管损伤、肝纤维化及PBC炎症持续的重要原因,但机制未明。单核细胞(monocyte, Mo)不仅是重要的固有免疫应答细胞,而且通过呈递抗原、分泌细胞因子等调节适应性免疫应答。研究显示Mo是一异质性群体,根据其表面CD16分子的表达,分为CD16-Mo亚群和CD16+Mo亚群,后者根据CD14分子表达的强弱进一步划分为CD14hihCD16+Mo亚群和CD14dimCD16+Mo亚群。相较于CD16Mo, CD16+Mo高表达HLA-DR、共刺激分子及粘附分子等,分泌更多的促炎因子,因此也称为炎症性Mo。新近研究显示炎症性Mo在感染和某些自身免疫性疾病中表达异常,并且在其致病中发挥重要作用,而越来越引起关注。但是炎症性单核细胞亚群在PBC中是否表达异常及参与发病尚未见报道,因此,本论文首先分析PBC患者外周血单核细胞亚群的免疫表型与比例,并探讨其与临床实验指标的相关性；此外通过Mo与CD4+T细胞共培养体系,进一步深入研究其调控CD4+T细胞分化的机制,为寻找治疗新靶点及阐明PBC致病机制提供科学的实验依据。目的：本研究拟以PBC患者外周血中单核细胞亚群免疫表型特征为出发点,首先分析炎症性单核细胞亚群与PBC的实验室血清学指标之间的相关性；进一步研究PBC患者外周血中炎症性单核细胞亚群对CD4+T细胞分化的影响。方法：1.分离PBC患者与对照组外周血单个核细胞PBMCs,流式细胞术检测单核细胞表型及比例；2.全自动生化仪检测PBC患者外周血肝功能指标(腺苷脱氨酶ADA,谷丙转氨酶ALT,谷草转氨酶AST,γ-谷氨酰转肽酶GGT,碱性磷酸酶ALP)和炎症指标(C反应蛋白CRP),并进一步与Mo亚群进行Pearson相关分析；3.胞内细胞因子染色,流式细胞术检测PBC患者外周血Thl/Th17细胞比例,并进一步与Mo亚群进行Pearson相关分析；4.磁珠分选PBC患者外周血CD16-Mo亚群和CD16+Mo亚群,并分别与CD4+T细胞共培养和transwell实验,流式细胞术检测PBC患者外周血Thl/Th17细胞比例；5.RT-PCR检测Mo亚群中IL-12p35、IL-12p40和IL-18基因表达水平；在CD4+T细胞与Mo亚群共培养体系中加入抗体阻断剂,流式细胞术检测Thl细胞比例。结果：1.相较HC组,PBC患者组CD14highCD16+Mo和CD14dimCD16+Mo亚群表达上调[PBCCD14high CD16+Mo(11.59±5.39)％.HC CD14high CD16+Mo(5.86±1.83)％,PBC CD14dim CD16+Mo(15.84±5.34)％.HC CD14dim CD16+Mo(4.68±2.10)％(P均<0.05)],相较CHB组,CD14dimCD16+Mo亚群表达上调[(15.84±5.34)%、(6.16±2.22)%(P<0.05)]；2.PBC患者CD14dimCD16+Mo亚群细胞与ADA(r=0.582,P<0.01)及炎症活动指标CRP水平(r=0.629,P<O.01)呈正相关,与ALT,AST,GGT和ALP均不相关(P>00.05)；3.PBC患者外周血CD16+Mo亚群与Thl细胞呈正相关(r=0.545,P<O.01),与Th17细胞不相关(P>0.05)；4.CD16+Mo与CD4+T共培养体系相较CD14highCD16+Mo与CD4+T共培养体系,Thl细胞比例增高[(19.43±1.57)%、(14.42±2.37)%(P,0.05)],而Th17细胞比例无变化[(0.52±0.56)%、(0.44±0.47)%(P>0.05)]；5.CD16+Mo与CD4+T直接接触相对不接触,Thl细胞比例增高[(18.42±3.87)%,(10.53±3.48)%(P<0.05)]；6.CD16+Mo相较CD16-Mo高表达IL-12p40,用IL-12p40阻断剂阻断后Thl细胞比例显著降低(P<O.05)。结论：1.PBC患者外周血CD14highCD16+Mo。和CD14dimCD16+Mo亚群表达上调,并且CD14dimCD16+Mo亚群与ADA、CRP呈正相关；2.炎症性单核细胞亚群通过细胞-细胞接触和分泌IL-12促进Th1细胞分化。