IL-2、IL-15诱导扩增的脐带血NK细胞生物学特性研究

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目的本研究探讨脐带血表型为CD3-CD56+的NK细胞以及经IL-2、IL-15诱导扩增后免疫表型与细胞毒活性等生物学改变的特性。方法使用Ficoll淋巴细胞分离液分离出脐带血单个核细胞,在无血清培养的条件下,分别加入IL-2、 IL-15、IL-2联合IL-15,在培养箱中培养14天,流式细胞仪检测CD3-CD56+NK细胞亚群含量以及NK细胞上CD16、CD62L、NKG2D、NKG2A、NCR44、NCR46、颗粒酶B、穿孔素的表达情况;并且使用WST-1法检测培养后的NK细胞对K562细胞毒活性。结果经过14天的培养,扩增后的IL-2、IL-15、IL-2/IL-15三组NK细胞分别扩增了10.78±2.51、10.42±3.72、10.54±6.24倍,这三组之间无显著差异;扩增后的CD3-CD56+NK细胞表达CD16的比例有显著减低,IL-2和IL-15组之间差异显著;使用细胞因子扩增后的NK细胞中CD62L的表达未曾改变;使用IL-2扩增后,NKG2A、NCR46表达有所下调,而使用IL-15扩增后则发生相反的作用;IL-2和IL-15两种细胞因子均有上调NKG2D、穿孔素、NCR44表达的作用,且细胞因子之间也存在差异;IL-15有上调NK细胞颗粒酶B的表达作用;细胞因子扩增的NK细胞毒活性显著增高,但细胞因子之间无显著差异。结论在无血清培养条件下,IL-2和IL-15都能使脐带血中NK细胞出现有效地扩增。虽然CD3-CD56+NK细胞经过两种细胞因子扩增后,与其功能相关的免疫表型呈现出不同的改变特征,但其细胞毒活性均显著增加,且两种细胞因子之间无显著差别,协同作用不明显;NK细胞毒活性是各种活性分子共同作用的结果。
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