【摘 要】
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猴头菇是中国传统的药食同源真菌,具有良好的药用价值和保健功效。猴头菇多糖是猴头菇的主要活性成分之一,具有降血糖、抗氧化和抗癌等生物活性,受到研究学者的广泛关注。目前,对猴头菇多糖的提取、结构和生物活性研究的较多,且大多数提取猴头菇多糖的方法为热水浸提、超声和酶法提取,但是多糖长时间暴露于高温条件下会导致多糖的结构受到破坏,进而影响其生物活性。为了保持多糖的结构不被破坏,并维持其较高的生物活性。因此
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猴头菇是中国传统的药食同源真菌,具有良好的药用价值和保健功效。猴头菇多糖是猴头菇的主要活性成分之一,具有降血糖、抗氧化和抗癌等生物活性,受到研究学者的广泛关注。目前,对猴头菇多糖的提取、结构和生物活性研究的较多,且大多数提取猴头菇多糖的方法为热水浸提、超声和酶法提取,但是多糖长时间暴露于高温条件下会导致多糖的结构受到破坏,进而影响其生物活性。为了保持多糖的结构不被破坏,并维持其较高的生物活性。因此,本论文采用4℃低温提取,对猴头菇多糖的提取工艺进行优化,进而得到猴头菇多糖纯品HEP,研究其结构特点和抗氧化活性的效果。本实验以吉林长白山的猴头菇为原材料,通过单因素和正交试验,确定了猴头菇多糖的最佳提取工艺为:提取温度为4±0.5℃,提取时间11h,料液比1:30（g/mL）,醇沉浓度75%。通过4±0.5℃水浸提,离心、抽滤取上清液,反复冻融至体积1/5,用75%乙醇沉淀、Sevage法除蛋白、AB-8脱除色素,经过真空冷冻干燥得到水溶性的猴头菇多糖,经过截留量为3500 Da分子量的袋透析和Sephadex-G150纯化得到猴头菇多糖,命名为HEP。采用苯酚-硫酸法测得HEP糖含量为96.43±0.12%,糖醛酸含量为3.16±0.03%。经过高效液相色谱分析可知HEP分子量为1.97 × 104 Da。经过气相和离子交换色谱得到HEP的单糖组成为岩藻糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖以及少量的葡萄糖醛酸,其摩尔比为1:2.87:0.09:0.12:0.01。通过高碘酸氧化、Smith降解、甲基化分析、傅里叶红外以及核磁共振分析表明:推测HEP是以α-1-4-Fuc和α-1-6-Gal 为主链,以→3,6)-α-D-Man-（1→和→1,6）-Glc 为支链,以α-D-GlcpA-(1为T末端。HEP的比旋光度为+55°;通过DSC以及TGA对HEP的热稳定性测定可知:HEP热解过程主要分为两个过程,其熔点为75.93℃。刚果红和圆二色谱表明HEP无三股螺旋结构,SEM结果显示猴头菇多糖为表面光滑的片层状结构。体外抗氧化实验表明,HEP对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基和ABTS自由基清除都具有一定的清除能力。结果发现,HEP对DPPH自由基清除能力较强,最高的清除率能达到91.72±0.17%,与Vc的清除能力基本相当。
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