一株小单孢菌次生代谢产物的初步研究

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小单孢菌(Micromonospora)是一类能产生多种抗生素的稀有放线菌,且产生的抗生素生物活性各异、结构类型多种多样。就近年来从小单孢菌中发现的新抗生素数目而言,小单孢菌已有渐渐赶超链霉菌的趋势。本文对源白程海湖的小单孢菌进行筛选,并对其中1株小单孢菌进行了次生代谢产物研究。实验内容包括:小单孢菌的化学筛选(初筛和复筛);目标菌株发酵时间的考察;目标菌株发酵;单体化合物的分离纯化及结构解析。本研究首先对来源于程海湖的94株小单孢菌进行少量液体发酵,将得到的发酵液提取物进行初步的筛选。经过TLC(薄层层析)点板分析,从中选出条带丰富且极性分布适中的菌株,并综合菌株的长势以及菌株形态,最终确定7株小单孢菌进入复筛。然后对这7株菌进行10L液体放大发酵,对其发酵提取物进行正相硅胶以及凝胶划段初步分离后,TLC点板分析。同时,对粗提物进行HPLC线性梯度分析,并采用统计学方法对代谢产物丰富度及极性分布进行了科学、直接的分析。最终确定了一株代谢产物丰富度好、极性分布适中的菌株C4680作为目标菌株进行放大发酵。最后对该菌株进行280L放大发酵,处理后得到总粗提物。随后,在TLC以及HPLC化学分析指导下,运用正相硅胶柱层析、凝胶柱层析、高效液相色谱制备等分离纯化技术共分离得到了15个化合物,通过波谱学方法共鉴定出10个化合物的结构,分别为:1-(3-Deoxy-β-L-erythro-pentofuranosyl)-uracil,1-(3-Deoxy-β-L-erythro-pentofur-anosyl)-5-methyluracili, Trichothecolone,,cyclo(L-Val-L-Ile),4-hydroxybenzoic acid,4-hydroxybenzaldehyde,6a-Hydroxytrichodermo1,6a-Hydroxyscirpene,,Trichodermol,8-dihydrotrichothecinol A。本工作为进一步开展该环境下小单孢菌次生代谢产物研究奠定了基础。
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