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老瓜头是萝藦科鹅绒藤属植物,老瓜头生物总碱是从老瓜头中提取的生物总碱,具有镇痛、抗炎、止咳、祛痰、平喘以及增强免疫功能等多种药理作用,因此可作为药用资源进行开发和利用。由于老瓜头生物总碱抗炎作用的机制尚未完全阐明,为此,本课题以角叉菜胶诱导的大鼠气囊滑膜炎为模型,研究老瓜头生物总碱对大鼠气囊滑膜炎的作用及其作用机制。
第一部分老瓜头生物总碱对大鼠气囊滑膜炎的作用
目的:研究老瓜头生物总碱对角叉菜胶诱导的大鼠气囊滑膜炎模型的抗炎作用。
方法: SD 雄性大鼠60只,随机分为六组,分别是:正常对照组、模型组、吲哚美辛组、老瓜头生物总碱低、中、高剂量组。以大鼠皮下注射25mg/kg角叉菜胶诱导气囊滑膜炎建立动物模型,于致炎前1h及致炎后6h分别采用腹腔注射给药,正常对照组给予生理盐水,阳性对照组给予10mg/kg吲哚美辛,药物处理组分别给予2,4,8mg/kg老瓜头生物总碱。致炎后12h宰杀大鼠,用4ml Hank’s液灌洗气囊,收集灌洗液并准确计量。用试管稀释法计数白细胞,考马斯亮兰蛋白试剂盒检测大鼠灌洗液中蛋白含量。
结果:与正常对照组相比,模型组渗出液量、灌洗液中白细胞数及蛋白含量明显升高;与模型组相比,老瓜头生物总碱能明显减少气囊滑膜炎大鼠渗出液量、灌洗液中白细胞数及蛋白含量。
结论:老瓜头生物总碱对大鼠气囊滑膜炎具有抗炎作用。
第二部分老瓜头生物总碱对气囊滑膜炎大鼠炎症介质的影响
目的:探讨老瓜头生物总碱对气囊滑膜炎大鼠灌洗液中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF-a)和白细胞介素-6( IL-6)含量的影响。
方法: SD 雄性大鼠60只,随机分为六组,分别是:正常对照组、模型组、吲哚美辛组、老瓜头生物总碱低、中、高剂量组。以大鼠皮下注射25mg/kg角叉菜胶诱导气囊滑膜炎建立动物模型,于致炎前1h及致炎后6h分别采用腹腔注射给药,正常对照组给予生理盐水,阳性对照组给予10mg/kg吲哚美辛,药物处理组分别给予2,4,8mg/kg老瓜头生物总碱。致炎后12h宰杀大鼠,用4ml Hank’s液灌洗气囊,收集灌洗液。用NO检测试剂盒检测大鼠灌洗液中NO含量;用放射免疫方法检测大鼠灌洗液中TNF-a和IL-6含量。
结果:模型组大鼠气囊灌洗液中NO、TNF-a及IL-6含量升高,与正常对照组相比差异具有统计学意义; 与模型组相比,老瓜头生物总碱能降低气囊滑膜炎大鼠灌洗液中NO、TNF-a和IL-6含量。
结论:老瓜头生物总碱的抗炎作用与其抑制细胞NO、TNF-a和IL-6的合成有关。
第三部分老瓜头生物总碱对气囊滑膜炎大鼠抗氧化能力的影响
目的:探讨老瓜头生物总碱对气囊滑膜炎大鼠血清中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力及总抗氧化能力(T-AOC)的影响。
方法: SD 雄性大鼠60只,随机分为六组,分别是:正常对照组、模型组、吲哚美辛组、老瓜头生物总碱低、中、高剂量组。以大鼠皮下注射25mg/kg角叉菜胶诱导气囊滑膜炎建立动物模型,于致炎前1h及致炎后6h分别采用腹腔注射给药,正常对照组给予生理盐水,阳性对照组给予10mg/kg吲哚美辛,药物处理组分别给予2,4,8mg/kg老瓜头生物总碱。致炎后12h宰杀大鼠,股动脉放血。用MDA、SOD、T-AOC检测试剂盒分别检测大鼠血清中MDA含量、SOD活力和T-AOC。
结果:模型组大鼠血清中MDA含量升高及SOD活力和T-AOC降低,与正常对照组相比,差异具有显著性; 与模型组相比,老瓜头生物总碱能明显降低气囊滑膜炎大鼠血清中MDA含量并且能提高SOD活力和T-AOC。
结论:老瓜头生物总碱的抗炎作用与其提高大鼠体内抗氧化物质的含量有关。