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PHSP1，豌豆(Pisum sativum)线粒体热激蛋白70(mitoehondrial heatshock protein，mtHSP70)基因，其编码产物为HSP70家族成员，在线粒体前体蛋白跨膜转运中起着重要作用。
本研究首先利用基因工程方法构建了原核表载体pET-28a-PHSP1和pET-His-PHSP1将重组质粒pET-28a-PHSP1转化大肠杆菌BL21(DE3)，经0.5mmol/L IPTG(异丙基B-D-硫代半乳糖苷)37℃诱导4h，12％SDS-PAGE电泳，可见一分子量约为70 kDa的蛋白条带，用抗mtHSP70特异性抗体进行Western blotting杂交检测，证实该表达蛋白确是PHSP1蛋白。进一步优化了外源PHSP1基因在大肠杆菌中的表达条件(IPTG浓度、温度、时间)，表明0.25mmol/L IPTG、37℃、诱导5h，目的蛋白表达量最高。该外源基因在大肠杆菌BL21(DE3)qb表达量高于ER2566，pET-28a-PHSP1在BL21(DE3)中表达量高于pET-His-PHSP1。
其次，构建了植物表达载体pB1121-PHSP1，将PHSP1置于CaMV35S启动子控制之下，通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105介导，将PHSP1基因转入烟草叶片组织中。30d后，经卡那霉素筛选获得抗性苗。对获得的抗性苗进行PCR扩增和Western blotting检测，证实目的基因成功整合到烟草基因组并得以表达。
对野生型和转基因烟草进行盐胁迫处理(0、100、300mmol/L NaCl，时间为0、6、24、48h)，发现300mmol/L NaCl胁迫48h后，野生型烟草叶片损伤程度较转基因烟草严重。进一步测定叶片SOD(超氧化物歧化酶)、POD(过氧化物酶)活性、CAT(过氧化氢酶)。结果表明，随着盐浓度提高及胁迫时间延长，三种酶活性变化不同，但同一处理下，转基因烟草酶活性始终高于野生型。表明转PHSPI基因在盐胁迫条件下减缓了保护酶活性的降低，有利于提高烟草抗氧化能力及耐盐性。