新肿瘤相关基因1A6/DRIM表达规律的初步研究

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为进一步研究此与肿瘤发生相关的基因的功能,我们从1A6/DRIM基因在细胞周期中的表达规律入手开始研究.该实验采用N<,2>O-TdR阻断细胞周期同步化和正常培养条件下流式细胞分选两种方法,收集胃癌细胞系BGC-832不同周期时相的细胞,分析1A6/DRIM蛋白在细胞周期不同时相中的表达量的变化和定位情况.Western blot结果显示1A6/DRIM在G1期细胞核中表达量最高,在S期和G2期核中表达减少.免疫荧光结果显示1A6/DRIM蛋白在细胞中与核仁蛋白Ki-67的表现极为类似.人为控制周期阻断法和自然状态下流式分选法的结果相同.为进一步探讨1A6/DRIM蛋白在BGC-823细胞撤除血清培养的应激条件下的变化规律,我们对BGC-823细胞在无血清条件下培养,结果发现随血清撤除时间的延长,不断有细胞漂浮,这些细胞经DAPI染色为凋亡细胞,凋亡细胞数量随血清撤除时间延长而增多.但仍存在大量贴壁细胞,这些细胞无凋亡现象.选取这部分贴壁BGC-823细胞,在不同的时间点分析1A6/DRIM在细胞核中的表达情况.
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