【摘 要】
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马齿苋（Portulaca oleracea L.）,一年生草本植物,药食同源植物之一,在食品、中药等领域都有着广泛的应用。多糖是马齿苋中重要的功能性成分,但硒化后多糖的活性变化尤其是免疫活性研究较少。因此,本研究以野生马齿苋为原料,提取马齿苋多糖（PSPO）并硒化修饰,得到两种硒化多糖（SePSPO-1,SePSPO-2）,探究硒化修饰对马齿苋多糖体外免疫活性的影响,从而为天然食品成分开发和修饰
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马齿苋（Portulaca oleracea L.）,一年生草本植物,药食同源植物之一,在食品、中药等领域都有着广泛的应用。多糖是马齿苋中重要的功能性成分,但硒化后多糖的活性变化尤其是免疫活性研究较少。因此,本研究以野生马齿苋为原料,提取马齿苋多糖（PSPO）并硒化修饰,得到两种硒化多糖（SePSPO-1,SePSPO-2）,探究硒化修饰对马齿苋多糖体外免疫活性的影响,从而为天然食品成分开发和修饰提供理论依据。主要研究结果如下:（1）提取马齿苋多糖并实现硒化修饰。通过水提醇沉法制备可溶性马齿苋多糖（Purslane polysaccharides,PSPO）,多糖含量为855.4 g/kg,蛋白质和灰分含量分别为41.2 g/kg和91.7g/kg。单糖组成分析结果表明,马齿苋多糖由11种单糖组成,包括木糖、岩藻糖、甘露糖、果糖、葡萄糖醛酸、鼠李糖、核糖、半乳糖、阿拉伯糖和葡萄糖组成。选用化学硒化（硝酸-亚硒酸钠法）对马齿苋多糖进行硒化修饰,得到硒含量为753.8 mg/kg的SePSPO-1和硒含量为1325.1 mg/kg的SePSPO-2;红外结果显示在775 cm-1和1086 cm-1出现硒多糖的特征峰。未进行硒化修饰的PSPO硒含量仅为80.6 mg/kg,表明无机硒元素共价连接于马齿苋多糖。（2）硒化修饰增强了马齿苋多糖的体外抗氧化活性,且抗氧化能力与多糖剂量和硒化程度呈正相关。测定结果显示,硒化后的多糖（SePSPO-1和SePSPO-2）对三价铁的还原力增加8.21%,对羟自由基和ABTS两种自由基的清除活性分别增长39.67%和13.04%,且PSPO、SePSPO-1、SePSPO-2的抗氧化能力依次增加,说明马齿苋多糖具有抗氧化能力并且硒化修饰使该能力得到了进一步的增强。（3）硒化修饰增强了马齿苋多糖对RAW 264.7巨噬细胞的免疫调节作用。采用MTT法测细胞存活率、中性红法吞噬能力以及ELISA法测定细胞因子水平,结果显示SePSPO-1和SePSPO-2比PSPO更能够调节巨噬细胞的体外免疫活性;随着硒化度和多糖剂量的提高,细胞存活率显著上升,吞噬指数由1.16增加到了1.48,细胞因子如白细胞介素-6（Interleukin,IL-6）由13.85 pg/mL显著增加至47.58 pg/mL,肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平由68.78 pg/mL提高到144.16 pg/mL,IL-1β分泌量由2.87 pg/mL升至11.71 pg/mL。（4）硒化修饰使马齿苋多糖对小鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用得到增强。以小鼠脾淋巴细胞为模型,采用CCK-8法,测定经脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）和刀豆蛋白（Concanavalin A,Con A）诱导的脾细胞增殖情况,ELISA法测定细胞因子以及流式细胞术探究脾细胞分型情况,结果发现:SePSPO-1和SePSPO-2比PSPO能够更有效地促进淋巴细胞增殖,上调干扰素-γ（Interferon-γ,IFN-γ）的分泌,降低IL-4的分泌量,同时提高T淋巴细胞的T辅助（CD4+）细胞和T细胞毒性（CD8+）细胞的比例。结果证实硒化修饰能够增强马齿苋多糖对脾淋巴细胞的免疫调节活性。整体上,化学硒化修饰是增强马齿苋多糖体外免疫调节活性的有效途径,而较高的硒化度会带来更大的调节作用。
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