【摘 要】
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民猪是东北地方猪种,具有优秀的抗寒能力。因此,深入研究民猪的脂肪细胞分化机制对于挖掘民猪抗寒相关遗传资源,对促进民猪优秀种质资源的保护和利用具有深远意义。ZNF423基因是成脂的关键因子,在脂肪细胞的分化和成熟中不可或缺,但目前它在猪脂肪细胞发育过程中的具体机制尚不清晰,本研究以民猪前脂肪细胞为研究对象,在前脂肪细胞分化和成熟过程中,通过过表达、干扰和miRNA调节ZNF423基因表达的方法,对Z
【基金项目】
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国家自然科学基金（U20A2052,31872980）； 黑龙江省省属科研院所科研业务费项目（CZKYF2021-2-C025）； 黑龙江省博士后项目（LBH-Z18263）；
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民猪是东北地方猪种,具有优秀的抗寒能力。因此,深入研究民猪的脂肪细胞分化机制对于挖掘民猪抗寒相关遗传资源,对促进民猪优秀种质资源的保护和利用具有深远意义。ZNF423基因是成脂的关键因子,在脂肪细胞的分化和成熟中不可或缺,但目前它在猪脂肪细胞发育过程中的具体机制尚不清晰,本研究以民猪前脂肪细胞为研究对象,在前脂肪细胞分化和成熟过程中,通过过表达、干扰和miRNA调节ZNF423基因表达的方法,对ZNF423在调控脂肪生成过程中的表达模式和作用进行研究。同时,利用表观遗传试剂5-Aza-Cd R和TSA处理民猪脂肪细胞,研究它们对ZNF423的调控作用及对脂肪生成能力的影响。本研究结果将为深入揭示猪脂肪细胞生成和调控机制提供试验依据。获得主要研究结果如下:（1）冷刺激条件下,民猪背部脂肪、胸部脂肪和颈部脂肪的脂肪生成能力较其他部位脂肪更强,在背部脂肪组织中出现较强的米色脂肪基因表达特征,同时背部脂肪中与脂肪生成和产热相关基因的表达也明显增加。（2）在原代培养的民猪前脂肪细胞中过表达ZNF423后,产热基因和脂代谢基因表达水平升高,米色脂肪标记基因表达水平降低。说明ZNF423具有促进脂肪产热和向白色脂肪细胞分化的功能。（3）在原代培养的民猪前脂肪细胞中干扰ZNF423后,产热基因表达水平升高,脂代谢基因表达水平降低,米色脂肪标记基因表达水平升高,说明干扰ZNF423能抑制脂肪生成,可能促进白色脂肪向米色脂肪转化。（4）成功验证ZNF423是miR-425-5p的靶基因且miR-425-5p能通过对ZNF423负调控模式来影响脂肪和产热生成。（5）成功筛选出在诱导分化0d加入500nmol/L的5-Aza-Cd R和150nmol/L的TSA为最佳的药物浓度和加入时间。表观遗传试剂5-Aza-Cd R能够降低ZNF423基因表达,而TSA则能够提高ZNF423基因表达。它们通过对民猪前脂肪细胞中ZNF423基因的表达影响脂肪生成和代谢。试验结果表明,ZNF423能够参与并影响民猪脂肪细胞的脂肪分化和产热过程,具有抑制脂肪细胞米色化和促进产热的功能。
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