青光眼是世界上仅次于白内障的第二大致盲性眼病，具有高度的遗传异质性，根据发病原因可分为原发性青光眼和继发性青光眼。原发性青光眼主要包括原发性先天性青光眼、原发性开角型青光眼及原发性闭角型青光眼。原发性先天性青光眼(primary congenital glaucoma PCG)是婴幼儿最常见的青光眼类型，国外已在不同种族的人群中证实其主要致病基因为CYP1B1基因，国内只有3篇相关的报道，发现了3种CYP1B1基因的突变；原发性开角型青光眼(primary open-angle glaucoma POAG)是成人常见的青光眼类型，已发现的3种与之相关的致病基因(MYOC，OPTN，WDR36)只能解释不足10％的POAG患者的发病。近来，国外有学者在POAG患者中发现了CYP1B1基因的突变，这为研究POAG发病机制打开了新的通路，但国内尚无相关报道。因此，在中国PCG和POAG患者中筛查CYP1B1基因突变，了解CYP1B1基因在我国PCG和POAG患者中的突变情况，对认识CYP1B1突变特点及相关青光眼的病因有一定意义。 第一部分中国原发性先天性青光眼CYPlBl基因的突变筛查 目的：分析中国PCG患者中CYP1B1基因的突变情况。 方法：收集41名原发性先天性青光眼患者临床资料，抽取外周静脉血制备基因组DNA，采用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)及异源双链-单链构像多态分析(Heteroduplex Analysis-Single Strand Conformation Polymorphism，HA-SSCP)方法初步分析患者CYP1B1基因编码区，含差异带型的片段通过直接测序检验，测序所得新发现采用限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism，RFLP)分析方法在80名正常对照中验证。 结果：在14.6％(6／41)的PCG患者中发现了6种不同的突变，其中4种为新突变：2种缺失突变(c．726_747 de122bp，c.828delC)和2种错义突变(S336Y，1471S)，错义突变的位点均位于CYP1B1蛋白序列的保守核心结构区(Conserved Core Structures CCS)。通过RFLP分析方法在80名正常对照中未发现这4种新突变。此外，本研究还发现2种已报道过的错义突变(R469W，R390H)。在9。8％(4／41)的中国PCG患者中出现的R390H，为本研究中出现频率最高的突变。前述6名PCG患者中，2名携带CYP1B1的纯合突变，其余4名携带复杂合突变。 结论：CYP1B1基因突变与约14.6％的中国PCG患者相关，并以常染色体隐性方式致PCG发病。已知的错义突变R390H可能为中国PCG患者中最常见的突变类型。 第二部分中国原发性开角型青光眼CYPlBl基因的突变筛查 目的：探讨CYP1B1基因突变与POAG的关系，了解CYP1B1基因型与POAG表型间的对应关系，为进一步研究CYP1B1基因致病机制奠定基础。 方法：收集54名原发性开角型青光日艮患者临床资料，抽取外周静脉血制备基因组DNA，采用PCR及HA-SSCP方法初步分析患者CYP1B1基因编码区，含差异带型的片段通过直接测序检验，测序所得新发现采用HA-SSCP分析方法在80名正常对照中验证。 结果：在2名POAG患者中发现了2种不同的错义突变：新突变L89Q、已报道突变R390H。上述两名患者中一名患者携带杂合突变(R390H／wt)，另一名患者携带复杂合突变(L89Q／R390H)。此外，在一名POAG患者中发现了一个新的可能的单核苷酸多态(c.1552G＞C，V518L)。在80名正常对照中通过HA-SSCP方法未发现L89Q及碱基变异V518L。 结论：CYP1B1基因的突变是中国POAG发病的一个危险因素，在某些情况下以单基因遗传方式引起POAG并使其发病年龄提前。