背景胶质母细胞瘤（Glioblastoma,GBM）是恶性程度最高的星形细胞肿瘤,因其不规则生长迅速以及侵袭性较强,手术常难以做到全切,术后复发率很高。替莫唑胺（Temozolomide,TMZ）具有良好的中枢神经系统渗透性和低副作用,目前已成为治疗GBM的首选化疗药。然而,在临床上TMZ治疗的客观有效率仅为40%左右,这主要是因为O~6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（O~6-methylguanine DNA methyltransferase,MGMT）介导了GBM患者对TMZ的耐药。因此,对于MGMT高表达的GBM患者,如何通过降低MGMT的活性提高TMZ治疗效果,是当前研究的一个热点。Neddylation抑制剂MLN4924能够穿过血脑屏障并抑制肿瘤细胞的生长,其抗癌效果稳定,目前已进入Ⅰ/Ⅱ期临床试验。然而MLN4924与现有GBM化疗手段联合,尤其是对于TMZ治疗效果的影响还未有报道。目的本研究旨在探讨Neddylation抑制剂MLN4924能否增加GBM对TMZ的敏感性并分析其潜在的分子机制。方法1.基于TCGA（The Cancer Genome Atlas）和GTEx（Genotype-Tissue Expression）数据库,我们使用GEPIA2工具分析了MGMT在GBM样本中的表达情况并做了生存预后分析,随后又通过Meth Surv在线工具分析了MGMT启动子Cp G岛甲基化状态对其转录水平以及相关生存预后的影响。2.体外培养T98G细胞,将其分为对照（Ctrl）组、MLN组、TMZ组及联合（TMZ+MLN）组。利用CCK-8细胞毒性实验检测细胞活力,克隆形成实验检测细胞增殖能力,蛋白印迹法检测通路蛋白。结果1.GEPIA2在线工具分析表明,MGMT在GBM组织中的表达要高于正常脑组织,并且MGMT高表达与不良预后有关。2.Meth Surv在线工具分析表明,MGMT启动子Cp G岛高甲基化患者预后较为良好,其甲基化水平与MGMT的转录水平呈负相关。3.CCK-8细胞毒性实验表明,MLN4924与TMZ联用时的细胞存活率最低,在72h化疗增敏效果最为明显,化疗增敏比为2.131±0.140。4.克隆形成实验表明,联合组的克隆数目最少,并且联合组的相对克隆抑制率明显高于TMZ组（P＜0.01）,化疗增敏比为2.645±0.290。5.蛋白印迹法检测相关通路蛋白显示,MLN4924能通过抑制p-IκBα泛素化降解,抑制NF-κB活性从而下调MGMT蛋白的表达。结论1.MGMT在GBM中表达上调,其转录水平与启动子Cp G岛甲基化状态呈负相关,并且MGMT高表达患者的预后情况更差。2.MLN4924通过抑制NF-κB活性下调MGMT的表达,从而增加TMZ化疗敏感性。