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背景:癌症相关死亡的第三大原因是胃癌。同长期生存率差的晚期疾病患者这一临床现状相比,目前胃癌治疗取得的一些进展就显得微不足道。同时虽然外科手术和辅助治疗方面取得了很大的进展,但胃癌患者由于转移癌复发,5年生存率仍然较低。因此,阐明胃癌转移的分子机制对于改善患者的生存状况至关重要。已有研究表明表皮生长因子受体家族成员如Erb B1和Erb B3参与肿瘤的进展和转移。此外,Erb B1、Erb B3在胃癌中共同过表达多伴有预后不良,与此同时其可用于胃癌患者的靶向治疗。基因的靶向疗法已成为近年来研究的热点,随着各个领域对胃癌原癌基因和抑癌基因的深入研究,许多围绕胃癌的基因治疗靶点已经被发现。Ebp1是新发现的Erb B3胞内结合蛋白,前期研究发现Ebp1能够诱导胃癌细胞的增殖,但胃癌细胞迁移和侵袭的作用是否与Ebp1相关仍然不是很明确。正因如此,我们开展了本次研究,目的:探究胃癌恶性行为与Ebp1的相关性,以及发生相互作用内在的分子机制,同时为胃癌细胞的靶向治疗和临床诊治提供实验依据。方法:使用ualcan软件分析各种癌症中PA2G4基因的表达以及在胃癌组织和癌旁组织间的差异性表达。然后采取重组慢病毒的转染方法敲低了胃癌癌细胞中的Ebp1表达。细胞的迁移、侵袭能力,使用划痕实验、Transwell实验进行检测。Ebp1与EMT蛋白网络,Ebp1和PI3K/Akt/m TOR蛋白的网络都使用STRING软件来构建。Ebp1对于EMT相关蛋白表达的影响以及Ebp1对于PI3K/Akt/m TOR信号通路中的关键蛋白的磷酸化水平的影响都使用Western blot法检测。结果:1.ualcan数据库的结果表明:数种癌组织中都观察到了Ebp1蛋白的异常表达。胃癌组织和其癌旁组织的Ebp1表达的水平差异明显,Ebp1在癌旁组织中的表达远远低于胃癌组织（*P＜0.05）。2.转染效果的检测:使用Western blot检测,结果发现:Ebp1蛋白表达水平出现了明显差异。与sh-NC组相比sh-Ebp1蛋白表达水平出现明显降低（***P＜0.001）,结果说明,敲低Ebp1基因后的MGC-803胃癌细胞系已经构建成功。3.划痕实验表示:划痕愈合率的差异在sh-Ebp1组与sh-NC之间尤为明显,统计分析结果显示,划痕愈合率呈现断崖式下降的是sh-Ebp1组（24h:**P＜0.01,48h:***P＜0.001）,结果说明:胃癌MGC-803细胞迁移能力的强弱,与Ebp1基因密切相关,即随着Ebp1基因的敲除,癌细胞的迁移能力出现被显著的抑制的现象。4.Transwell实验表明:穿透滤过膜细胞的数量在sh-Ebp1组与sh-NC相之间有明显的差异,sh-Ebp1组穿透滤过膜细数量明显减少（***P＜0.001）,结果表明,Ebp1基因被沉默之后,MGC-803胃癌细胞侵袭的能力出现大幅降低。5.Ebp1和EMT相关蛋白的网络使用STRING软件构建,分析其结果得出:Ebp1与EMT蛋白关系甚密。对Western blot在蛋白水平检测结果进行统计分析表明:随着敲低Ebp1基因这一变量的变化,蛋白表达也随之改变,如E-cadherin蛋白的表达显著增高（***P＜0.001）;N-cadherin蛋白,Vimentin蛋白,Snail蛋白,Slug蛋白和MMP2蛋白显著降低（***P＜0.001）。6.为了寻找Ebp1和PI3K/Akt/m-TOR信号通路的关联,我们使用STRING软件构建两者的蛋白网络,通过对该蛋白网络的观察分析发现:Ebp1与PI3K/Akt/m TOR信号通路蛋白关系紧密。因此,使用Western blot在蛋白水平进行检测后表明:p-PI3K、p-AKT、p-m TOR的蛋白表达水平在Control组与LY294002组有明显差异,LY294002组的这三种蛋白表达水平都出现下降（***P＜0.001）,而Ebp1的蛋白表达水平未见明显的变化;Perifosine组同Control组相比的p-AKT以及p-m TOR蛋白表达水平出现的明显下降（***P＜0.001）,Ebp1以及p-PI3K的蛋白表达水平无明显变化;rapamycin组同Control组相比,p-m TOR蛋白表达下降（**P＜0.01）,未出现蛋白表达水平变化的有:Ebp1、p-PI3K以及p-AKT;Sh-Ebp1同Control组相比,这几种蛋白表达水平均出现下降,包括:Ebp1、p-PI3K、p-AKT及p-m TOR蛋白。7.划痕实验及Transwell实验结果表明:同Control组相比,随着胃癌细胞经处理,其迁移和侵袭的能力也随之发生了改变。在LY294002组、Perifosine组、rapamycin组以及sh-Ebp1组这四组中有着具体的表现,即这几组细胞的迁移和侵袭的能力都被显著的抑制（划痕:**P＜0.01,Transwell:***P＜0.001）。用软件对Western blot的结果进行统计分析发现:以Control组作为参照,E-cadherin蛋白表达水平上调（***P＜0.001）出现在以下几组:经处理后的LY294002组、Perifosine组、rapamycin组以及sh-Ebp1组,与此同时,这几种蛋白表达水平出现下调（***P＜0.001）:N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug、MMP2蛋白。结论:1.敲低了Ebp1基因后,胃癌MGC-803细胞迁移以及侵袭能力被弱化。2.敲低了Ebp1基后可以出现MGC-803胃癌细胞EMT进程的抑制。3.Ebp1可以通过PI3K/Akt/m TOR通路调节制EMT进程,促进胃癌MGC-803细胞发生迁移及侵袭。