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微生物絮凝剂由于具备环境友好,易被降解的性质,近年来受到广泛的关注。本课题组前期从云南大叶种普洱茶叶片(Camellia assamica)中筛选得到一株内生细菌,发现其发酵液具有明显的絮凝活性,经鉴定该细菌为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium),命名为B.megaterium PL8。其产生的胞外多糖型絮凝剂BM2对多种废水具有显著的絮凝效果。本研究对该多糖型絮凝剂BM2进行分离纯化、结构解析、絮凝机理探究,并且将其应用于多种废水处理。为该生物絮凝剂的工业应用提供了初步支持。本研究的实验结果如下:(1)B.megaterium PL8在30℃发酵72 h后,微生物生物絮凝剂产量为0.784±0.08g/L。粗提得到的絮凝剂总糖含量为78.5%(w/w),蛋白含量为9.2%(w/w)。采用Sevag法除去絮凝剂中的蛋白,经过DEAE-52阴离子交换层析柱分离获得两种多糖组分BM1和BM2。其中BM2分子量为4.55×106 Da,总糖含量为87.8%。BM2单糖组成为摩尔比45.1:33.8:9.3:9.2:2.4的半乳糖:半乳糖醛酸:葡萄糖:葡萄糖醛酸:甘露糖。红外光谱和X射线光电子能谱显示BM2含有大量羧基和少量氨基。甲基化分析显示BM2中的糖苷键有7种,分别为(1→3)-linked Gal,(1→)-linked Gal,(1→)-linked Glc,(1→2)-linked Glc,(1→3)-linked Glc,(1→3,4)-linked Man和(1→2,6)-linked Man。(2)多糖型絮凝剂BM2对高岭土悬浮液的絮凝条件探究实验表明:BM2的浓度为30 mg/L时,絮凝活性达到最大值90.23%;BM2在p H 4~11范围内有着较高的絮凝活性,絮凝活性大于80%;在p H为8时,絮凝率达到最大值88.66%;BM2在温度20℃~100℃范围有着较高的稳定性,絮凝活性大于87%,在温度为60℃时达到最大值90.45%。多糖絮凝剂BM2对刚果红有明显的脱色作用,当BM2浓度为150 mg/L,刚果红初始浓度为100 mg/L,反应体系p H=7时,脱色率达到最大值为88.14%;BM2对重金属有吸附作用,当BM2浓度为1250 mg/L,金属离子初始浓度为100 ppm时,对Pb2+,Zn2+,Ni2+的吸附率分别为81.64%,51.82%和33%。(3)经过化学方法测得BM2和高岭土颗粒之间的作用键主要是离子键。絮凝反应前后的Zeta电位变化结果表明,BM2的主要絮凝机理可能是吸附架桥。