寡糖的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析方法研究

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寡糖(Oligosaccharides)是生物体内重要的信息物质。寡糖的诸多生物学功能决定了它在医药领域有着广泛的应用前景。近些年来对寡糖的生物活性研究的非常多,表现在免疫调节功能、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、抗凝血、抗血栓、降血糖、降血脂等多种作用。寡糖作为一类新的生理活性物质,在营养与保健、疾病诊断与防治方面的应用有着极大潜力。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry MALDI-TOF- MS)是最近发展起来的一种软电离质谱分析技术,与传统分析技术如气相色谱技术、液相色谱技术、毛细管电泳技术及其他质谱电离源分析技术相比较, MALDI具有灵敏度高;高通量;对样品的纯度要求不高,可以直接分析未处理过的生物样品等许多优点; MALDI-TOF-MS能提供寡糖直观的分子量和结构信息,实现检测和鉴定的目的。本研究通过对MALDI-TOF-MS分析中性寡糖和酸性寡糖的方法进行系统的研究,旨在找到合适的分析中性与酸性寡糖的基质,阐明影响MALDI分析的重要实验因素的作用,对基质作用的机理进行了探讨,并建立MALDI–TOF- MS分析寡糖的实验方法,从而实现对不同类型寡糖的分析,丰富了寡糖的分离分析技术。根据研究目的,选择以下寡糖进行试验:中性寡糖包括还原型的中性寡糖和非还原型的中性寡糖;酸性寡糖包括含糖醛酸的酸性寡糖,含唾液酸的酸性寡糖和含硫酸基团的酸性寡糖。在试验中,以葡聚糖、棉子糖和古罗糖醛酸三糖为寡糖模型,试验了不同的基质包括单一基质和混合基质,和不同的实验因素包括基质、基质浓度、混合基质配比、点样方法,检测模式。通过MALDI-TOF-MS分析提供的各种寡糖的质量信息,应用MassLynx V4.0软件进行比较分析,确定标准的实验方法和影响分析结果的重要实验因素。在标准实验方法建立后,
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