结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是一类恶性的消化道肿瘤,有着极高的发病率和致死率,在所有癌症种类中排名第三,是人类亟待解决的医学问题之一。在我国,经济不断发展、生活水平不断进步的同时,结直肠癌的发病率也在逐步增长。结直肠癌的早期症状并不明显,晚期容易发生转移,这也造成了其极高的致死率。结直肠癌的发病大多是由不健康的生活习惯造成的,少数病例也有遗传性因素,但是发病的分子机制还没有明确的解释。如何有效避免结直肠癌的发生、准确进行结直肠癌的分期分型、提高术后生存期,需要研究人员更加深入地探究结直肠癌发病的分子机制。microRNA(miRNA)是一种含量与种类都很丰富的小型非编码单链RNA,长约19-23个核苷酸。通常miRNA可以和靶基因mRNA 3’UTR中的部分序列发生反向互补配对,招募其它蛋白抑制mRNA的翻译或是直接将其切割(从而引起mRNA的降解),以达到对靶基因表达的沉默。这一类转录后水平的基因调控与生物的生长发育、代谢以及细胞凋亡密切相关。miRNA可以调节多种多样的生命过程,也有越来越多的研究表明miRNA参与了肿瘤的发生和发展。根据它们的功能,这些与肿瘤相关的miRNA可以被分为“原癌miRNA”或“抑癌miRNA”两类。明确miRNA在癌症中调节基因表达的机理将对结直肠癌的诊断与治疗有重要意义。DPH1在卵巢癌和乳腺癌中被认为是一种肿瘤抑制基因。除卵巢和乳腺之外,DPH1在人体各个组织以及发育的各个阶段均可以表达。为了探究DPH1在结直肠癌中的作用,我们检测了 13对结直肠癌组织及其癌旁组织中DPH1的表达情况。我们发现结直肠癌组织中DPH1蛋白显著上升。接着,在人结直肠癌细胞系SW480和HT29中我们发现DPH1表达的增强促进了结直肠癌细胞的增殖和迁移,而DPH1表达的减少则抑制了结直肠癌细胞的增殖和迁移。这证实了 DPH1在结直肠癌中起到原癌基因的作用。然后,为了明确结直肠癌中DPH1蛋白表达发生变化的原因,我们将目标转向到miRNA这个重要的转录后调控因子上。通过生物信息学预测我们找到了可能调控DPH1的miRNA——miR-218-5p。接着,在细胞水平上我们发现miR-218-5p与结直肠癌细胞中DPH1的表达呈负相关,并利用luciferase报告基因实验确定miR-218-5p通过其种子序列与DPH1 mRNA 3’UTR结合从而直接靶向DPH1。最后,我们通过CCK-8、EDU、transwell等功能实验证明了miR-218-5p可以通过负调控DPH1,抑制结直肠癌细胞的增殖和迁移。综上所述,本项研究揭示了DPH1作为原癌基因在结直肠癌发生发展中的重要作用,并且发现miR-218-5p可以通过调节DPH1来影响结直肠癌细胞的增殖和迁移,为DPH1的生物学功能和结直肠癌产生的分子机制提供了新的见解。