目的:本实验对枯草芽孢杆菌Pab02细胞壁肽聚糖进行分离提取和理化性质的分析,检测不同浓度肽聚糖对小鼠免疫功能的影响,为微生态制剂、免疫增强剂的开发和应用提供理论依据。　　 方法:(1)采用三氯乙酸法对枯草芽孢杆菌Pab02细胞壁肽聚糖进行分离提取。分析枯草芽孢杆菌肽聚糖氨基酸组成:运用Bradford法测定其蛋白质含量;用苯酚-硫酸法测定其多糖含量;用香草醛法测定其总脂含量。(2)测定枯草芽孢杆菌肽聚糖对小鼠免疫功能的影响。动物分组:5周龄健康昆明系小鼠208只,随机分为4组。对照组腹腔注射0.9％无菌生理盐水0.5 ml/只;低剂量组腹腔注射0.5 mg/ml枯草芽孢杆菌肽聚糖溶液,0.5 ml/只:中剂量组腹腔注射1 mg/ml枯草芽孢杆菌肽聚糖溶液0.5 ml/只;高剂量组腹腔注射2 mg/ml枯草芽孢杆菌肽聚糖溶液0.5 ml/只。检测小鼠各项免疫指标:①检测胸腺、脾脏绝对重量、指数和迟发型超敏反应。②运用分光光度计法测定小鼠血清溶菌酶含量、抗菌活力、血清溶血素和脾抗体生成细胞。③运用流式细胞法测定外周血及脾脏T淋巴细胞亚群。④运用碳廓清法测定巨噬细胞吞噬能力。⑤MTT法测定脾淋巴细胞增殖刺激指数。　　 结果:(1)分离提取的枯草芽孢杆菌Pab02细胞壁肽聚糖得率为11.26％。氨基酸组成的分析显示所提取的肽聚糖样品中氨基酸组成与枯草芽孢杆菌菌体氨基酸组成一致。化学组分分析显示肽聚糖中蛋白质含量为53.55％,总糖含量32.98％,总脂为2.91％。(2)不同浓度枯草芽孢杆菌肽聚糖对小鼠各项免疫指标均有提高作用:①肽聚糖组免疫器官绝对重量和指数均高于对照组,且呈现明显的量效关系。迟发型超敏反应显示,肽聚糖组足挚厚度较对照组显著增加。说明肽聚糖可以促进免疫器官的生长发育,提高机体对特异性抗原的免疫能力。②经不同浓度肽聚糖注射小鼠血清溶菌酶含量、抗菌活力、血清溶血素和脾抗体生成细胞均优于对照组,且呈现明显的量效关系。提示肽聚糖可以有效提高机体特异性和非特异性免疫能力。③外周血及脾脏T淋巴细胞亚群检测显示肽聚糖组CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD4+/CD3+CD8+均高于对照组,且与肽聚糖浓度呈正相关,提示肽聚糖可以提高机体T淋巴细胞亚群含量,进而对维持机体较高免疫力具有良好的作用。④肽聚糖组碳粒廓清率明显高于对照组,且随肽聚糖浓度呈增加趋势。说明肽聚糖具有提高小鼠单核巨噬细胞吞噬能力的功能,从而增强机体非特异性免疫功能。⑤芽孢杆菌肽聚糖能显著提高小鼠脾淋巴细胞增殖刺激指数且呈现明显的量效关系。可见肽聚糖可以促进小鼠免疫细胞的生长,进而促进免疫系统的发育,提高机体免疫功能。