富硒壶瓶碎米荠对青鱼幼鱼生长、代谢和免疫指标的影响

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本试验为探究富硒壶瓶碎米荠(selenium-rich Cardamine hupingshanensis)对青鱼(Mylopharyngodon piceus)幼鱼生长、血清生理生化、肝脏硒代谢、抗氧化能力、免疫能力及糖代谢相关指标的影响,以期为青鱼幼鱼配合饲料的开发奠定理论基础。选取360尾初始体重为(5.51±0.02)g的青鱼幼鱼随机分配至4个试验组中,每组3个重复。在基础饲料中添加富硒壶瓶碎米荠的量为0、0.5、1.0和2.0 g/kg(硒的实际含量分别为0.04、0.43、0.75和1.57 mg/kg),同时添加矿物质预混料(无硒化合物添加)和维生素预混料,配置成4种等氮等能的青鱼幼鱼试验饲料,养殖周期为60天。结果显示:饲料中添加富硒壶瓶碎米荠对青鱼幼鱼终末重量(FBW)、增重率(WG)、特定生长率(SGR)、饲料系数(FCR)影响显著(P<0.05)。而饲料中富硒壶瓶碎米荠的添加在青鱼幼鱼各组间肝体指数(HSI)、肥满度(CF)、成活率和鱼体水分、粗灰分无显著差异(P>0.05)。富硒壶瓶碎米荠添加量为1.0 g/kg时可显著提高鱼体粗蛋白含量(P<0.05)。饲料中富硒壶瓶碎米荠添加量为0.5-1.0 g/kg时,血清中的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)、白蛋白(ALB)含量呈上升趋势,而葡萄糖(GLU)含量显著下降(P<0.05)。肝脏中硒代半胱氨酸裂解酶(SCLY)、硒磷酸合成酶1(SPS1)、15k Da硒蛋白(SEP15)、硒蛋白T2(SEPT2)、硒蛋白H(SEPH)和硒蛋白P(SEPP)相关基因表达量在饲料中富硒壶瓶碎米荠添加量为1.0 g/kg时较对照组(0 g/kg)显著升高(P<0.05)。饲料中添加0.5-1.0 g/kg富硒壶瓶碎米荠时,可显著提高肝脏中核因子E2相关因子2(Nrf2)的相对基因表达量,而Kelch样ECH关联蛋白1(keap1a和keap1b)的相对基因表达量显著降低(P<0.05)。肝脏中Mn-超氧化物歧化酶(MnSOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)相对基因表达量在富硒壶瓶碎米荠添加量为0.5-1.0 g/kg时显著升高,而谷胱甘肽-S转移酶A(GST-A)在其添加量为0.5 g/kg时显著降低(P<0.05)。肝脏中Cu/Zn超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)、谷胱甘肽-S转移酶M(GST-M)和谷胱甘肽还原酶(GR)的相对基因表达量不受饲料中富硒壶瓶碎米荠添加量的影响(P>0.05)。同时,饲料中添加0.5-1.0 g/kg富硒壶瓶碎米荠时,肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和总抗氧化能力(T-AOC)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量显著升高(P<0.05)。饲料中富硒壶瓶碎米荠添加量为2.0 g/kg时,肝脏中肝脏表达抗菌肽2a(Leap2a)的相对基因表达量较其他组显著降低(P<0.05)。饲料中添加0.5-1.0 g/kg富硒壶瓶碎米荠可显著提高肝脏表达抗菌肽2b(Leap2b)、铁调素(HEPC)、溶菌酶(LYZ)和补体3(C3)相关基因表达量(P<0.05)。饲料中添加1.0 g/kg富硒壶瓶碎米荠可以显著提高肝脏中葡萄糖激酶(GK)的相对基因表达量(P<0.05),而其添加量对磷酸果糖激酶(PFK)和丙酮酸激酶(PK)的相对基因表达量无显著性影响(P>0.05)。葡萄糖-6-磷酸(G6Pase)、果糖-1,6-二磷酸(FBP)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)的相对基因表达量均呈现先降低后升高的趋势,且在富硒壶瓶碎米荠添加量为1.0 g/kg时达到最低值(P<0.05)。当饲料中添加0.5-1.0 g/kg富硒壶瓶碎米荠时,可显著提高肝脏中GK、己糖激酶(HK)活性和肝脏及肌肉中糖原的含量(P<0.05)。肝脏中PFK和PK活性随饲料中富硒壶瓶碎米荠的添加呈持续上升的趋势,在其添加量为2.0 g/kg时显著升高(P<0.05)。当富硒壶瓶碎米荠添加量为1.0 g/kg时,可显著升高乳酸脱氢酶(LDH)活性和丙酮酸含量,而乳酸(LD)含量在其添加为0.5 g/kg时达到最高,较过量组(2.0 g/kg)显著升高(P<0.05)。肝脏中PEPC、PEPCK、G6Pase活性在各组间无显著性差异(P>0.05)。肝脏H&E染色和油红O染色显示,饲料中添加富硒壶瓶碎米荠有利于改善肝细胞空泡化现象,当其添加量为0.5-1.0 g/kg时会显著提高肝脏中脂滴数量和脂滴面积(P<0.05)。由此可见,在饲料中添加0.5-1.0 g/kg富硒壶瓶碎米荠可以促进青鱼幼鱼生长,增加鱼体的蛋白沉积,促进机体硒代谢,提高肝脏抗氧化、免疫和糖代谢能力。
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