热疗及化疗前后大肠癌细胞粘附分子表达和细胞凋亡的研究

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为了探讨热疗及热化疗联合对大肠癌细胞株粘附分子表达和细胞凋亡的影响以及了解热疗对肿瘤转移过程的分子生物学改变该研究首先用免疫组织化学方法在HT29,HCT-8,LoVo,T84和SW620等人类大肠癌细胞株中筛选表达粘附因子ICAM-1、CD44V6、E-Cadherin及nm23的细胞株.将体外培养的人类大肠癌细胞株HT-29、HCT-8及LoVo.于实验室模拟热疗条件(单纯水浴43℃,60分钟)加以处理.用免疫组织化学检测大肠癌细胞株中ICAM-1、CD44V6及E-Cadherin蛋白表达的改变.利用RT-PCR了解细胞株中粘附因子mRNA转录水平表达情况;采用流式细胞仪监测大肠癌细胞株中细胞凋亡(DNA倍体,早期凋亡).用丝裂霉素以及热化疗联合处理HT-29、HCT-8及LoVo等细胞并利用上述方法同样观察蛋白质表达的变化,mRNA转录水平改变以及细胞凋亡情况.共设计四个实验组:热疗前,热疗后(0h,2h,4h,8h,12h,24h,48,72h),化疗以及热化疗联合.
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