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目的Rho GTP酶是一组鸟核苷酸调节蛋白,其介导的细胞运动可能在恶性肿瘤的侵袭和转移中发挥重要作用。最近研究发现,RhoC与Rho家族其它成员相比,与其下游效应蛋白ROCK结合力更强,因而认为RhoC对细胞骨架介导的细胞运动调节能力更强,RhoC的作用可能贯穿于肿瘤转移的全过程。此外,在肿瘤细胞的上皮间质转化过程中也发现有细胞骨架的改变,细胞具有更强的侵袭和迁移能力。由于RhoC效应与EMT的表现存在诸多相似,这种相似性是因为两者之间具有一定的关联,还是彼此独立,值得进一步研究。因此本文通过TGF(31诱导肺腺癌A549细胞上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition, EMT),研究RhoC对肺腺癌上皮-间质转化(EMT)的影响。方法利用5ng/ml TGFβ1处理人肺腺癌A549细胞株,用倒置显微镜观察细胞形态学变化,Western-blot检测上皮表型标志蛋白E-cadherin和间质表型标志蛋白Vimentin的表达情况,Transwell体外侵袭试验检测细胞侵袭能力的改变以评价细胞是否发生间质化转换；同时Western-blot方法检测(?)RhoC蛋白表达的改变,Pull-down assay分析RhoC(?)舌性的变化；在TGFβ1处理细胞前后向细胞内转入RhoCshRNA,通过观察细胞的形态,检测(?)E-cadherin和Vimentin蛋白的表达和细胞侵袭能力的改变,分析抑制RhoC表达对EMT的影响。结果经TGFβ1处理48h后,A549细胞形态发生明显改变,E-cadherin表达明显减低,并出现Vimentin蛋白表达升高,体外侵袭实验提示细胞侵袭能力明显增强,说明细胞发生了EMT。与此同时RhoC的表达和活性增强,抑制RhoC的表达能明显降低细胞的体外侵袭能力。用RhoC shRNA处理A549细胞48h,再用5ng/ml TGFβ1处理A549细胞48h后细胞内并没有出现EMT的特征性表现；在5ng/ml TGFβ1处理A549细胞48h后,再用RhoC shRNA干预处理的A549细胞48h,细胞内并没有出现EMT的逆转(MET)。结论1.TGF-β1可以诱导A549细胞出现EMT。2.抑制RhoC的表达能阻滞TGF-β1诱导的EMT进程,但是对于已经发生了EMT的A549细胞,抑制RhoC并不足以逆转EMT。