【摘 要】
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目的探讨格列苯脲（Glibenclamide,GLC）对血管损伤后内膜增生的作用以及对血管平滑肌细胞（Vascular smooth muscle cell,VSMC）表型转换、增殖和迁移的作用及其潜在的机制。方法本研究通过构建肥胖小鼠颈动脉结扎动物模型以及用棕榈酸（palmitic acid,PA）诱导血管平滑肌原代细胞（Primary vascular smooth muscle cells,
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目的探讨格列苯脲（Glibenclamide,GLC）对血管损伤后内膜增生的作用以及对血管平滑肌细胞（Vascular smooth muscle cell,VSMC）表型转换、增殖和迁移的作用及其潜在的机制。方法本研究通过构建肥胖小鼠颈动脉结扎动物模型以及用棕榈酸（palmitic acid,PA）诱导血管平滑肌原代细胞（Primary vascular smooth muscle cells,PVSMCs）,在体内体外两个水平,研究了GLC对内膜增生的作用和机制。通过H＆E染色、Masson染色和PCNA免疫组化研究GLC对内膜增生的作用。用GLC和PA联合处理PVSMCs后,细胞增殖与毒性检测试剂盒（Cell Counting Kit-8,CCK-8）和Western blot检测PVSMCs的增殖能力;划痕实验和Transwell实验检测PVSMCs的迁移能力;酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）测定肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白细胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）的分泌;活性氧（reactive oxygen species,ROS）检测试剂盒检测PVSMCs中ROS的水平;分别用超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）试剂盒、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）试剂盒以及谷胱甘肽（glutathione,GSH）试剂盒检测PVSMCs内SOD、MDA和GSH的水平;分别用GLC处理、NFκB抑制剂BAY11-7082以及转染HMGB1过表达质粒后,通过Western blot检测高迁移率族蛋白B1（High mobility group box 1,HMGB1）、核因子κB抑制蛋白α（NF-kappa-B inhibitor alpha,IκBα）、核因子κB（Nuclear factor kappa-B,NFκB）以及NFκB和IκBα的磷酸化蛋白表达水平检测HMGB1/NFκB信号通路的作用。结果GLC能够抑制肥胖小鼠血管损伤后的内膜增生。GLC还能抑制PA诱导的PVSMCs炎症因子的释放和氧化应激反应。GLC通过抑制HMGB1/NFκB通路抑制了PA诱导的PVSMCs表型转换、增殖和迁移。结论GLC在体外实验中通过调控HMGB1/NFκB信号通路抑制了PA诱导的PVSMCs表型转换、增殖和迁移,在体内实验中抑制了肥胖小鼠颈动脉结扎后的内膜增生。
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