论文部分内容阅读
目的：通过探讨IL-1β的诱导下,对不同钛板表面牙龈成纤维细胞对炎性因子的表达,以及比较不同的钛金属表面结构组分对HGF的贴附增殖的影响。方法：实验1、对牙龈成纤维细胞进行原代培养(组织块培养法),荧光倒置显微镜下观察细胞的生长状态。取第3代人牙龈成纤维细胞进行试验研究,用血球计数板计数法记录细胞的生长曲线,用免疫组化染色法以鉴定细胞来源。实验2、将消毒备用的钛板置于24孔培养板中,将牙龈成纤维细胞接种在三种不同表面处理的钛板上,分别在2 h后用MTT法检测牙龈成纤维细胞在不同表面处理的钛片种植体表面的贴附率,在5 d后用MTT法检测牙龈成纤维细胞在不同表面处理的钛片种植体表面的增殖率。实验3、第一组,将消毒备用的钛板置于24孔培养板中,将牙龈成纤维细胞接种在三种不同表面处理的钛板上,培养2 d后分别在3h、6h、24h后用聚合酶链反应(PCR)检测炎性因子IL-6以及IL-8的表达量。第二组,将消毒备用的钛板置于24孔培养板中,将牙龈成纤维细胞接种在三种不同表面处理的钛板上,培养2d后加入刺激因素IL-1p,分别在3h、6h、24h后用聚合酶链反应(PCR)检测炎性因子IL-6以及IL-8的表达量。实验数据采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果：1、免疫组化结果表明HGF角蛋白染色阴性,波形丝蛋白染色阳性,说明细胞来源于中胚层,而非上皮来源。细胞生长曲线呈"S"型,接种后24h内细胞略减少,24 h之后细胞生长速度加快,之后生长速度逐渐减缓,进入平台期,第七天细胞生长速度明显减慢。2、MTT法测得2h、5d后后纯钛、钛合金表面两种金属细胞附着率、增殖率无显著性差异(P>0.05),与钛表面氮化处理钛板细胞附着率、增殖率有显著性差异(P<0.05)。3、在IL-1β的诱导下,牙龈成纤维细胞对炎性因子(IL-6、IL-8)的表达量明显增加；纯钛与钛合金的钛板比表面氮化处理的钛板产生炎性因子(IL-6、IL-8)的表达量相对较少。结论：1、人牙龈成纤维细胞原代培养组织块培养法细胞成活率高,可培养出足够的细胞,细胞活性强,性状稳定。2、纯钛组、钛合金组牙龈成纤维细胞的贴附与增殖均良好,氮化钛组牙龈成纤维细胞的贴附与增殖被抑制(P<0.05)3、在IL-1p的诱导下,炎性因子可以得到高度表达；纯钛和钛合金这两种表面组分IL-6、IL-8表达量较少,在临床操作过程中,纯钛和钛合金表面组分种植体被广泛应用。