【摘 要】
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对我国特有的人胚肺二倍体成纤维细胞2BS为对象,我们通过抑制性消减杂交,比较低代龄的年轻细胞和高代龄的衰老细胞的基因表达水平,分别得到年轻细胞高表达或衰老细胞高表达的
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对我国特有的人胚肺二倍体成纤维细胞2BS为对象,我们通过抑制性消减杂交,比较低代龄的年轻细胞和高代龄的衰老细胞的基因表达水平,分别得到年轻细胞高表达或衰老细胞高表达的差异基因.经点杂交验证,对35个差异克隆片断进行测序及同源性分析,确定其序列特异性,再以Virtual Northern或Northern杂交确证部分基因随代龄变化的表达差异性;并检测它们在不同年龄供体的人体血细胞中的表达状况.结果表明:检测基因的表达不但随细胞代龄变化,而且在人体血细胞中随龄变化;提示它们不仅与细胞衰老相关,可能也与个体衰老相关.对所有差异基因进行基因功能分析表明:年轻细胞高表达基因中有数个氧化/还原酶系和mRNA前体加工因子,衰老细胞高表达的基因中有数个线粒体基因和免疫相关活性因子,这一变化方式与以往报道相似.最后,该文以细胞转染实验研究CSIG和TOM1对2BS细胞衰老过程的影响.CSIG为年轻高表达基因,年轻对衰老细胞的Northern杂交比(Y/O)为4.2;TOM1为衰老高表达基因,衰老对年轻细胞的Northern杂交比(O/Y)为2.5.综上,该论文从差异基因的筛选、基因克隆到基因功能的初步研究,得到CSIG新基因序列.并首次报道了CSIG和TOM1在细胞衰老过程中的变化和作用.
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