【摘 要】
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近来证据表明除五聚体C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)外,单体C-反应蛋白(monomeric CRP,mCRP)在炎症与心血管疾病之间发挥了重要的作用。然而目前还没有合适的mCRP定量
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近来证据表明除五聚体C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)外,单体C-反应蛋白(monomeric CRP,mCRP)在炎症与心血管疾病之间发挥了重要的作用。然而目前还没有合适的mCRP定量方法,因此建立一套可靠的mCRP定量方法将为在体检测mCRP提供一种手段,也可以为临床上对CRP与炎症疾病相关联的研究提供帮助。基于小分子还原剂DTT能够部分还原mCRP分子内二硫键(aa36-97),而pCRP能够抵制还原这一特性,我们在CRP浓度为5.0～80.0ug/ml范围内建立了两套适合于复杂体系的mCRP定量方案。根据每个方案所确定的还原比例,只需测得每个方案中还原形式的mCRP量,即能实现mCRP的定量。1)仅在30mM DTT的还原作用下,我们确定了 mCRP的还原比例为60%。该比例的应用须满足测得的还原形式mCRP值大于阈值(样本中pCRP浓度的7%,即来自于pCRP干扰所形成的还原形式mCRP值)。2)在DTT还原体系中加入SDS(0.5%),mCRP还原比例达到100%。同样,该比例须满足测得的还原形式mCRP值大于阈值(样本中pCRP浓度的10%)。我们建立的两套定量方案都能避开或控制因制样造成pCRP解聚的争议,从而实现对复杂体系mCRP定量条件的摸索。
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