【摘 要】
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白背飞虱是水稻主要害虫之一,其危害十分严重、涉及面积大、地区广泛;而且白背飞虱是一种迁飞性害虫,保幼激素是其体内十分重要的激素,影响其生长发育和翅型分化。同时,呋虫
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白背飞虱是水稻主要害虫之一,其危害十分严重、涉及面积大、地区广泛;而且白背飞虱是一种迁飞性害虫,保幼激素是其体内十分重要的激素,影响其生长发育和翅型分化。同时,呋虫胺为新一代烟碱类杀虫剂是防治稻飞虱的重要药剂。但目前,与白背飞虱保幼激素、呋虫胺对白背飞虱及其影响等研究的报道较为鲜见。所以本文使用呋虫胺对白背飞虱进行处理,研究呋虫胺胁迫对白背飞虱保幼激素及相关基因的影响。具体方法如下:一、采用酶联免疫分析ELISA法检测了白背飞虱不同虫龄阶段体内保幼激素Ⅲ的含量。二、通过race技术克隆与白背飞虱保幼激素终端合成相关基因的基因全长:保幼激素酸甲基转移酶基因JHAMT;以及与白背飞虱保幼激素分解相关基因的基因全长:保幼激素环氧水解酶基因JHEH。三、运用实时荧光定量,检测了白背飞虱不同生命阶段SfJHAMT、SfJHEH的表达水平。四、使用呋虫胺亚致死剂量处理白背飞虱,运用实时荧光定量,检测呋虫胺不同亚致死剂量胁迫下不同虫龄阶段白背飞虱SfJHAMT、SfJHEH的表达情况。经过试验,得到以下结果:一、若虫期间5龄白背飞虱保幼激素Ⅲ含量最低;成虫阶段白背飞虱保幼激素Ⅲ随着日龄的增加而增加,5日龄雌成虫含量达到201.4ng/L,7日龄后有所下降;同样,不同日龄之间保幼激素的含量不存在显著差异,但是成虫保幼激素含量均高于5龄若虫时期的保幼激素含量。二、保幼激素甲基转移酶SfJHAMT,预计基因全长1247bp,ORF区位于230-1057bp,长度为828bp,预计编码275个氨基酸;保幼激素环氧水解酶SfJHEH,预计基因全长2139bp,ORF区位于261-1616bp,长度为1356bp,预计编码451个氨基酸。三、通过荧光定量检测两种基因不同虫龄阶段的表达情况,发现SfJHAMT和SfJHEH不仅在白背飞虱若虫、成虫的不同生命阶段的表达情况有所不同,而且在雌、雄两性中的表达以及雌、雄两性是否交配的不同情况下也不尽相同。四、使用呋虫胺亚致死剂量处理白背飞虱,检测不同虫龄阶段白背飞虱SfJHAMT、SfJHEH的表达情况发现,不同浓度下同一生命阶段的白背飞虱SfJHAMT、SfJHEH基因表达量不同;同一浓度下不同生命阶段的白背飞虱SfJHAMT、SfJHEH基因表达量也不一样。
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