采用可注射性温敏性PCLA-PEG-PCLA水凝胶预防兔趾深屈肌腱损伤后粘连的实验研究

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研究目的:肌腱粘连(tendon adhesion)是肌腱损伤或修复术后的严重并发症,严重影响患者肢体功能活动及生活质量。前期动物实验(家兔)证明可注射性温敏性PCLA-PEG-PCLA水凝胶可有效预防腹腔术后粘连形成,本实验拟在家兔肌腱损伤动物模型上,研究该水凝胶在兔体内抗肌腱损伤后粘连的效果。实验材料和方法:家兔54只(平均体重:2.50kg),取左前肢2、4趾为实验趾。所用家兔随机分成3组:A组(PCLA-PEG-PCLA水凝胶组)、B组(医用透明质酸钠凝胶组)以及C组(阳性对照组)。实验动物全部以标准"shaving"外科损伤法合并掌侧屈肌腱离断术建立肌腱损伤模型,各组术中损伤处做不同处理:A组术区涂抹0.5mlPCLA-PEG-PCLA水凝胶,B组术区涂抹等量医用透明质酸钠凝胶,C组仅应用等量生理盐水。每组18只家兔再随机分为3小组,分别于1周、3周、6周三个时间点处死并取材:一,形态学观察:原手术入路解剖第2趾,双盲法进行大体观察并评定粘连分级,结果行统计学分析;第2趾予掌趾关节截趾术,行被动屈曲度测定后置于4%甲醛中固定24小时,取肌腱腱鞘复合物制成石蜡切片,行HE染色,依双盲法请病理科医生行切片组织学观察及粘连评定。二,生物力学测定:取第2趾利用特定模具行被动屈曲度测定,做统计学分析。取第4趾予骨掌趾关节离断术并获得完整游离实验趾,利用微控电子万能试验机(传感器load transducer)测定最大抽出力,做统计学分析。每个时间点分别随机取正常右前肢2、4趾分别作为未手术正常组(D组)。实验结果:一,形态学观察:1,大体观察:1周时大体粘连分级A<B<C,但三组之间差异没有统计学意义(P)0.05),3周时粘连评级B<A<C,其中B组与C组粘连程度差异有统计学意义(P<0.05),6周大体粘连分级C<B<A,但三组之间差异没有统计学意义(P)0.05)。2,组织学观察:2.1粘连评估:1周时组织学粘连分级A<B<C,但三组之间差异没有统计学意义(P)0.05),3周时组织学粘连评级A<B<C,但三组之间差异仍没有统计学意义(P)0.05),6周时组织学粘连分级C<B<A,但三组之间差异没有统计学意义(P>0.05)。2.2炎症反应评估:1周时炎症反应程度A<C<B,但三组之间差异没有统计学意义(P>0.05),3周时炎症反应程度A<B<C,但三组之间差异仍没有统计学意义(P)0.05),6周A、C组炎症反应消退,B组可见少量炎症细胞浸润腱鞘。A=C<B,但三组之间差异仍没有统计学意义(P)0.05)。二,生物力学测定:1,最大抽出力测定:一周时三组最大抽出力平均值A(1.211±0.472N)<B(1.553±1.140N)<C(2.198±1.122N),但是差异无统计学意义(P>0.05).三周时三组平均最大抽出力C(2.311±0.305N)<A(3.680±1.139N)<B(4.231±1.097N),其中B组与C组差异有统计学意义(P<0.05),六周时,三组最大抽出力平均值A(2.353±0.845N)<C(2.870±1.296N)<B(4.351±2.106N),但是差异无统计学意义(P>0.05).三个时间点阳性对照组与正常组差异均有统计学意义(P<0.05)。2,被动屈曲度:一周时三组被动屈曲度平均值:B(90.875±1.031°)>A(89.167±7.607。)>C(86.200±4.494°),但是差异无统计学意义(P>0.05).三周时三组被动屈曲度平均值:B(84.800±5.155°)>C(80.000±5.100°)>A(78.500±5.579°)但是差异无统计学意义(P>0.05)。六周时,三组被动屈曲度平均值:C(67.667±15.044°)>A(63.333±5.774°)>B(55.667±12.897°)但是差异无统计学意义(P>0.05)。三个时间点阳性对照组与正常组差异均有统计学意义(P<0.05)。实验结论:通过"shaving"外科损伤法合并掌侧屈肌腱离断术可建立稳定的、可重复性高的兔肌腱损伤模型。温敏性可注射性PCLA-PEG-PCLA水凝胶材料组织相容性好。患趾完全制动3周内,局部应用温敏性可注射性PCLA-PEG-PCLA水凝胶较不应用材料组有预防粘连形成和降低局部炎症反应的趋势。
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