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目的:1)以腺病毒做载体转染外源性hTGF-β1治疗性基因(Ad/CMV-hTGF-β1)到兔椎间盘髓核组织;2)观察外源性hTGF-β1基因在兔体内的表达并对其生物学效应进行测定。 材料和方法:1)采用本实验室构建的腺病毒为载体的Ad/CMV-hTGF-β1 20微升(6×10~6 pfu)注射于纯种成年新西兰大白兔腰椎间盘髓核内并设自身对照及磷酸盐缓冲液(PBS)实验对照组;2)手术后4天、1周、2周、4周分别取出椎间盘用免疫组织化学方法对转染的椎间盘髓核细胞及对照组进行基因表达产物测定;用VIDAS图象分析系统进行半定量观察。3)用间苯三酚分光光度法测定不同时间段椎间盘髓核组织中蛋白多糖量的变化。 结果:免疫组织化学染色显示注射Ad/CMV-hTGF-β1椎间盘,4天组可见髓核细胞内呈现阳性染色颗粒;1周组即显示强阳性染色,持续至4周组。实验对照组及自身椎间盘对照组呈阴性或极弱的阳性反应。髓核组织内蛋白多糖含量自1周组开始到4周,实验组较对照组增高,统计学显示差异有显著性。 结论:1)腺病毒为载体的Ad/CMV-hTGF-β1转染兔椎间盘髓核细胞能有效表达TGF-β1蛋白。2)腺病毒载体Ad/CMV-hTGF-β1转染兔稚间盘髓核细胞后,TGF-β1的表达能引起髓核组 织中蛋白多糖含量的增加。3)本研究显示腺病毒介导的外源性 治疗性生长因子基因转染适合子椎间盘髓核靶细胞内的导入, 因此对基困治疗用于椎间盘退变的逆转提供了一定的实验依据 及临床应用前景。