背景及目的:皮肤鳞状细胞癌在皮肤非恶性黑色素瘤中排名第二位,与目前生活环境中存在的紫外线照射、病毒感染、放射线、接触二甲苯等致癌物质有关。由于国人健康意识参差不齐,且皮肤鳞癌多发生于老年人群、低收入群体,通常发现及治疗较晚。目前采取的传统治疗手段如手术、放化疗多因副作用大,价格贵等给患者造成严重的心理压力和经济负担,光动力治疗作为新兴的治疗手段,在皮肤病与性病领域取得了良好的治疗效果,得到越来越多医生与患者的广泛关注。但是目前国内外对于光动力治疗皮肤鳞状细胞癌的作用机制研究较少,有研究表明,HMGB1的表达异常与临床多种肿瘤疾病相关,而IKKα则可间接的感受信号因子并调控肿瘤的发生与发展。HMGB1和IKKα对于光动力治疗对皮肤鳞癌的作用机制及临床意义有待进一步探究。本实验通过对比探究光动力治疗对小鼠皮肤鳞状细胞癌组织中HMGB1和IKKα表达的影响,并与正常小鼠皮肤组织进行对比;探讨HMGB1和IKKα两者在小鼠皮肤鳞癌组织中的联系。并进一步探寻HMGB1和IKKα在光动力治疗皮肤鳞状细胞癌治疗效果评价、预后等方面的价值,以期用于临床治疗。方法:1.以DMBA/巴豆油二阶段法联合NB-UVB构建BALB/c小鼠发生皮肤鳞状细胞癌,待瘤体直径长至1-5mm后选取20只经病理确诊为皮肤鳞状细胞癌的小鼠并随机分为4组,分别为空白对照组,不做任何特殊处理;激光组,仅照射同等剂量红光不涂药;ALA-PDT组,20%浓度ALA敷药3h后联同激光对照组给以633nm红光(照射剂量80J/cm2,照射时间10min)照射,每周进行1次,共进行5次;ALA组,仅外敷20%浓度ALA 3h。每次治疗前和治疗结束后1周测量小鼠肿瘤的长短径,计算小鼠肿瘤体积,计数小鼠瘤体的数目及小鼠体重。当小鼠死亡或者有肿瘤体积达到500mm3时停止研究。2.结束治疗1周后采用脱颈椎法处死所有小鼠,并立即切取小鼠皮肤鳞癌组织和正常小鼠皮肤组织,采用rt-pcr法及westernblot法在基因水平和蛋白水平检测不同组别小鼠皮肤鳞癌组织及正常小鼠皮肤组织中hmgb1和ikkα的表达。3.采用spss19.0软件对数据进行统计处理,所有数据用均数±标准差(?x±s)表示。采用单因素oneway-anova方差分析,两两比较用lsdt检验,两者间相关性分析采用spearman秩相关分析,重复测量数据采用重复测量数据方差分析和dunnett检验,以p<0.05为差异有统计学意义。结果:1.末次治疗结束后1周,ala-pdt组具有明显的抑制肿瘤生长的作用,对于皮损直径为1-3mm和(或)厚度<2mm的瘤体可基本消退,直径在4-5mm和(或)厚度>2mm可部分缓解,随着治疗次数的增多,瘤体个数逐渐减少;直径超过5mm无明显抑制肿瘤的效果,与治疗前相比肿瘤体积不断增大(p<0.05),空白对照组、激光组小鼠瘤体随着时间增长逐渐增多、增大,部分瘤体相互融合。2.实验研究后期除了ala-pdt组之外,空白对照组、激光组、ala组各有1-2只小鼠肿瘤体积超过500mm3,给予脱颈椎处死后切取皮损组织,余小鼠均存活至实验结束,治疗前后各组小鼠体重无明显差异(p>0.05)。3.hmgb1mrna和hmgb1蛋白在空白对照组、激光组、ala-pdt组和ala组4组小鼠的鳞癌组织中表达量都高于正常小鼠的皮肤组织,差异具有统计学意义(p<0.05),而且与空白组小鼠、激光组、ala组相比,ala-pdt组hmgb1mrna及hmgb1蛋白的表达量明显升高,差异具有统计学意义(p<0.01)。4.ikkαmrna在空白对照组、激光组、ala-pdt组、ala组小鼠的鳞癌组织中表达均高于正常小鼠的皮肤组织,差异具有统计学意义(p<0.05)。与空白对照组、激光组、ala组相比,ala-pdt组小鼠的鳞癌组织中ikkαmrna的表达量明显升高,具有统计学意义(p<0.01)。正常小鼠皮肤组织中并未检测到ikkα蛋白的表达,而4组实验小鼠的鳞癌组织中都检测到IKKα蛋白的表达,ALA-PDT组与其他3组相比IKKα蛋白的表达量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。5.在光动力治疗皮肤鳞癌的皮损组织中,HMGB1和IKKα的表达之间存在正相关性(r=0.948,P<0.05)。结论:1.ALA-PDT对于直径在3mm和(或)厚度在2mm以内的小鼠皮肤鳞状细胞癌治疗效果较好,能够显著抑制瘤体的生长速度。2.HMGB1在小鼠鳞癌组织中表达高于正常小鼠的皮肤组织,IKKα在正常小鼠皮肤组织中不表达,但在鳞癌组织中高表达,这提示HMGB1、IKKα与皮肤鳞状细胞癌的发生有密切联系。3.经过光动力治疗后的小鼠皮肤鳞状细胞癌组织中HMGB1、IKKα的表达呈正相关,这提示两者可能在调控光动力治疗皮肤鳞癌的作用途径中具有密切联系,发挥着重要作用,有待下一步研究,为临床皮肤鳞癌的预防及治疗提供更切实有效的方法。