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淋巴器官是对虾与免疫相关的重要器官,可高效而特异的清除侵入机体的病原体,对淋巴器官的研究是对虾免疫机制研究的重要组成部分。本文首先采用组织学方法研究了中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)淋巴器官的发生,用细胞学方法,辅以组织化学手段,对中国明对虾成体淋巴器官进行了研究,并探讨了血细胞与淋巴器官在免疫防御中的关系。结果显示: 淋巴器官由胃次动脉末端多次分支形成的淋巴小管网构成,胃次动脉自糠虾第3期由前侧动脉内皮细胞在肝动脉前方位置向外延伸开始形成,同时由幼体背一部的中胚层细胞在内皮细胞外堆积形成基质细胞。幼体发育至1.8cm时,延伸至肝胰腺前方的胃次动脉末端开始出现分支,3.5cm稚虾的淋巴器官由至少10个淋巴小管构成,形态接近成体淋巴器官。 淋巴小管基质细胞异染色质较发达,含胞质颗粒和大量胞器,呈PAS阳性和非特异性酯酶活性,无酚氧化酶活性。在直径较大(长径>2mm)的淋巴器官血窦中,出现了大量细胞团即球状体,大部分球状体细胞有较发达的异染色质,无胞质颗粒,呈弱的酚氧化酶活性,且由内向里逐渐出现细胞坏死的过渡形态。推测球状体由淋巴小管基质细胞脱颗粒后脱离管壁并在血窦中集合形成,以进一步清除侵入机体的异物,是对虾对环境压力的一种生理反应。球状体形成后,淋巴小管管壁出现大量核周胞质着色浅或不着色的细胞,电镜下可见许多细胞坏死,部分小管出现弱的酚氧化酶活性,可能是大量小颗粒细胞在淋巴小管中定居的结果,并作为具吞噬活性的细胞成为基质细胞的补充。 血细胞既是对虾细胞免疫的承担者,又是体液免疫因子的提供者,对血细胞产生和分化方式的研究有助于血细胞分类及功能的进一步探讨。本文采用组织学方法对中国明对虾幼体造血组织的分布进行了定位,采用细胞学和组织化学方法中国海洋大学周盯士学位勺仑岁弋对成体造血组织进行了研究,并初步探讨了血细胞在造血组织中的分化途径。结果显示造血组织主要分布于胃的背部及其两侧、头胸部附肢的基部。造血组织细胞可分为三类,即具高核质比和发达常染色质的干细胞、含条纹状颗粒和均质颗粒的年轻小颗粒细胞和含电子致密均质颗粒的大颗粒细胞,并观察到了干细胞分别向两类血细胞分化的一系列过渡形态,据此认为中国明对虾血细胞是由干细胞分别分化产生小颗粒细胞和大颗粒细胞。刚从造血组织释放的血细胞与循环血细胞仍有较大差异,需在循环系统中进一步发育成熟,而透明细胞可能是刚释放的年轻小颗粒细胞的未成熟阶段。 免疫诱导剂常应用于对虾体液免疫因子研究,本文以白斑症病毒和酵母聚糖为诱导剂注射刺激中国明对虾,测定了淋巴器官、鳃和肝胰腺的几种免疫相关酶活性,用酵母聚糖注射中国明对虾,观察了总血细胞数量和造血组织分裂指数的变化,以期进一步说明它们在机体防御中的作用。结果显示淋巴器官和鳃均具有一定的酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(s OD)、酸性磷酸酶(AcP)和碱性磷酸酶活性(ALP)活性,且淋巴器官的PO、SOD、ALP和ACP活性均高于鳃,肝胰腺无PO活性,SOD活性与淋巴器官相近,ALP和ACP活性明显高于淋巴器官和鳃。PO活性在注射刺激后2h明显增强,24h后降至对照组以下,SOD活性表现出较稳定的增长,淋巴器官和鳃中的ALP活性大多高于对照,ACP活性变化不显著。注射酵母聚糖后,中国明对虾血细胞总数在Zh时略低于对照,48h时略高于对照,造血组织的分裂指数于注射后24h明显高于对照,约为对照的1 .5倍,说明酵母聚糖可明显促进造血组织的细胞增殖活性。