【摘 要】
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目的:采用高渗盐-胰蛋白酶法制备脱细胞真皮基质并进行组织学观察和微生物学检测,探讨这种方法的可行性和机理。 材料与方法:SD大鼠4只:麻醉后常规消毒铺巾,以8%硫化钡溶液脱去
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目的:采用高渗盐-胰蛋白酶法制备脱细胞真皮基质并进行组织学观察和微生物学检测,探讨这种方法的可行性和机理。 材料与方法:SD大鼠4只:麻醉后常规消毒铺巾,以8%硫化钡溶液脱去躯干部皮毛,切取大鼠躯干全层皮肤制成厚约0.4mm的中厚皮,1MNaCl溶液37℃浸泡48h分离表真皮,以0.25%胰蛋白酶+0.1%EDTA溶液37℃分别热消化50、60、70、80、90分钟脱去细胞成分,并进行冷冻干燥处理。脱细胞真皮基质作光镜、电镜观察和微生物学检测并对不同时间热消化处理的脱细胞真皮基质进行比较分析。 结果:消化时间不同的脱细胞真皮基质均具有柔软、一定的柔韧性和伸展性、弹性好、弯曲不断裂的特点,组织学观察见表皮细胞均完全去除,但是消化90分钟,ADM的基底膜(Basement membrane complex,BMC)和胶原纤维的结构与排列有不同程度的破坏;消化50、60、70分钟的ADM虽然基底膜和胶原纤维的结构与排列正常存在,但脱细胞不完全;消化80分钟制备的ADM组织学检查基底膜完整连续,胶原纤维、弹力纤维结构及排列完整规则,没有细胞成分存在。微生物学检测没有细菌生长。 结论:采用高渗盐-胰蛋白酶法制备脱细胞真皮基质的方法能达到既完全脱去细胞成分又使基底膜完整连续,胶原纤维和弹力纤维结构及排列正常的双重目标,脱细胞真皮柔韧性好、不断裂,无细菌生长。
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