血小板活化因子对中耳粘膜上皮影响的实验研究

来源 :第一军医大学 南方医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yxhetao
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背景和研究目的:分泌性中耳炎(SOM)是临床上一种常见病、多发病,尤其多见于儿童,是引起小儿听力下降的最常见原因之一。其病因及发病机制十分复杂,多年以来国内外学者已进行了大量的研究,但仍尚未完全明确。近年来,炎症反应及其诱导产生的炎症介质参与SOM发病机制的观点越来越受到人们的重视,许多作者在研究中发现大量有生物活性的炎症介质在SOM的产生中可能起着重要的作用。血小板活化因子(PAF)是最强有力的炎症介质之一,本研究中我们对临床诊断为SOM患者的中耳积液中的PAF进行了测定以了解它在中耳积液中的生化特性,并着重研究了PAF在体外和体内对中耳粘膜上皮粘液纤毛运输系统功能、分泌功能以及粘膜上皮血管通透性的影响,结合中耳粘膜形态学的观察以阐明PAF在引发SOM中可能的发病机制,并进一步说明炎症介质在SOM的病因和发病机制中所起的作用和地位。 方法:1.采用反相高效液相色谱法测定了SOM患者中耳积液中的PAF。2.体内实验中将PAF注入豚鼠中耳腔,观察鼓膜以了解中耳积液情况,测定了考马斯亮蓝从豚鼠中耳腔运输到咽鼓管咽口所需时间(染料运输时间,DTT)的变化,并通过伊文斯蓝染液测定法研究了PAF对中耳粘膜血管通透性的影响。3.在体外实验中将PAF加入到培养的中耳上皮细胞中,测定了PAF对培养的中耳上皮细胞中粘性糖蛋白(MGP)分泌量的影响。 结果:1.SOM患者中耳积液中确有PAF的存在,本法的检出率为57.7%,且粘液性中耳积液中的PAF水平为78.17±35.77ng/ml,明显高于浆液性中耳积液中的42.38±27.53ng/ml。2.体内实验:PAF注入豚鼠中耳后可引起中耳积液的产生,并可发生ABR阈值的提高,病理学检查结果示实验耳的中耳粘膜有不同程度的肿胀、充血、局部出血、以及炎细胞的浸润,部分还可观察到咽鼓管管腔内粘液栓的形成,超微结构的观察见各实验耳中粘膜细胞的结构尚完整:PA F对中耳腔中DTT影响的结果显示,随着PAF作用浓度的增加和作用时间的延长,DTT值逐渐发生延迟,且在正常对照耳的咽鼓管咽口可见的波动性染料前端也逐渐消失;对中耳腔中渗出染液的吸光度测定结果示,与对照耳相比,实验耳的血管通透性明显增高。3.体外实验:PA F作用后可引起培养的中耳上皮细胞中MGP量的明显增加,这种作用随PAF浓度的增加而不断增强,且PA F作用4小时后即可观察到这种作用,随作用时间的延长,MGP的量发生进一步的增加。 结论:临床上诊断为SOM的患者其中耳积液中可检测到PAF的存在。将PAF注入豚鼠中耳腔内可引起SOM的发生。将PAF注入豚鼠中耳腔内可引起粘液纤毛运输系统的功能损害。PAF可引起豚鼠中耳粘膜血管通透性的增加。体外状态下PAF可以刺激培养的中耳粘膜上皮细胞合成和分泌粘性糖蛋白。总之,PAF作为一种强有力的炎症介质,在SOM的病因和发病机制中起着重要的作用。
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