【摘 要】
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目的:研究丁苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后不同时间点的病理形态学结果、细胞凋亡形态学表现、及凋亡调节蛋白Caspase-9(天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白激酶)表达的影响。
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目的:研究丁苯酞对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后不同时间点的病理形态学结果、细胞凋亡形态学表现、及凋亡调节蛋白Caspase-9(天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白激酶)表达的影响。方法:1.建立大鼠右侧大脑中动脉阻断(middle cerebral artery occulusion,MCAO)局灶性脑缺血再灌注模型。2.健康雄性Wistar大鼠随机分成假手术组、缺血再灌注组、NBP(丁苯酞)干预组,每组18只。每组又分别于缺血1h再灌注6h、12h和24h用于指标检测。3.HE染色观察脑组织形态病理学变化;免疫组化方法测定各组Caspase-9蛋白表达的变化;应用TUNEL染色方法观察各组神经元凋亡情况。结果:1.HE染色发现NBP干预组在再灌注各个时间点的梗塞灶与缺血组比较均减小,呈点状分布并且神经元损伤也明显减轻。2.免疫组化结果显示:与假手术组比较Caspase-9蛋白表达在缺血再灌注组明显升高,于缺血再灌注后6h开始出现并随着时间的延长Caspase-9表达逐渐升高,于再灌注24h到达最高(P<0.01);NBP干预组的Caspase-9阳性表达在各时间点均明显减少(均P<0.01)。3.TUNEL染色显示:缺血再灌注组大鼠可见大量凋亡细胞,于再灌注6h开始出现,随着再灌注时间的延长其凋亡细胞数持续升高在24h时达到最高(P<0.01);NBP干预组凋亡细胞与缺血再灌注组相比均明显减少(P<0.01)。结论:1.线栓法成功地制备了大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,术后大鼠神经功能缺损明显,TTC染色示脑梗死区,HE染色结果符合脑梗死病理过程。2.丁苯酞可显著减轻脑缺血再灌注后组织坏死,具有神经保护作用。3.丁苯酞对脑缺血再灌注引起的皮层和纹状体的神经细胞凋亡有明显抑制作用,可抑制脑组织凋亡调节蛋白Caspase-9的表达,从而阻断了caspase的始动激活,减少神经元的损伤和凋亡。
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