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目的探索氟的遗传毒性及维生素C(VC)、维生素E(VE)、维生素C联合维生素E (VC+VE)对染氟淋巴细胞损伤的干预作用效果。方法1.职业环境氟污染调查：以铝电解废气净化车间为污染源中心,在不同半径距离的工作位点设采样点检测空气中的氟,用氟离子选择电极法测定其含量。2.职业性氟接触与肿瘤发生的关系调查：通过问卷调查和医院病历收集该厂职工从1995～2009年底肿瘤发生情况,进行统计分析。3.氟的遗传损伤动物实验研究：(1)检测经低、中、高浓度(2mg·kg-1·d-18mg·kg-1·d-1、32mg·kg-1·d-1)氟化钠染毒14d后小鼠骨髓细胞微核率,(2)用衰减全反射傅立叶变换红外光谱技术(ATR-FTIR)在包括RNA/DNA标识波长(1020/1121cm-1)在内的波段进行扫描,检测小鼠肝细胞核化学结构的变化。4.氟的遗传损伤及VC、VE干预作用的体外细胞培养实验研究：提取正常人外周血淋巴细胞,培养48h后分组及处理：(1)用0.00、0.01、0.04、0.16、0.64mg/ml NaF(对照组、F1、F2、F3、F4)分别作用2h、4h、8h、16h后, MTT法测定淋巴细胞存活率。(2)淋巴细胞分为对照组、F1、F2、F3、F4,低、中、高VC剂量干预(VC1+F4、VC2+F4、 VC3+F4)组,低、中、高VE剂量干预(VE1+F4、VE2+F4、VE3+F4)组,低、中、高VC+VE剂量干预(VC1+VE1+F4、VC2+VE2+F4、 VC3+VE3+F4)组。对照组给予培养液28h, F1、F2、F3、F4组给予培养液24h后分别暴露于含0.01、0.04.0.16、0.64mg/ml NaF培养液4h, VC干预组分别于含4.16、64μmol/LVC培养液作用24h后暴露于0.64mg/mlNaF培养液4h, VE干预组分别于含2、10、50μmol/L VE培养液作用24h后暴露于0.64mg/ml NaF培养液4h, VC+VE干预组分别于含4+2、16+10、64+50μmol/L VC+VE培养液作用24h后暴露于0.64mg/ml NaF培养液4h,离心收集细胞,分别用MTT法测淋巴细胞存活率,Annexin V-FITC细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡率,单细胞凝胶电泳技术(SCGE)测定DNA的损伤,Elisa实验法检测细胞端粒酶含量。结果1.职业环境氟污染调查结果：以氟污染源铝电解废气净化车间为中心,在不同半径距离的工作位点空气中的氟浓度依次降低,呈现氟污染扩散浓度与距离的负向趋势,但均没有超过国家卫生标准(0.50mg/m3)。2.职业性氟接触与肿瘤发生的关系调查：厂区工人肿瘤粗发病率为117.95/10万(标化率为58.81/10万),标化发病率女性比男性高(男：女=1：2.64),肿瘤发病年龄高峰为40-49岁,前2位肿瘤男性为肝癌和肺癌,女性为乳腺癌和肺癌。与该地区非暴露人群比较,该铝厂工人的氟暴露可能使女性肿瘤发病率升高,为该市的2.14倍,肿瘤发病年龄提前,肿瘤构成基本相同。3.氟的遗传损伤动物实验结果：3.1动物实验小鼠骨髓细胞微核率随染氟浓度的增高而升高。3.2肝细胞核ATR光谱图呈1650cm-1、1550cm-1、1380cm-1、1260cm-1、1225cm-1、1155cm-1、1080cm-1、1030cm-1、970cm-1、930cm-1峰降低；光谱数据用统计软件进行主成分分析和3-D图形处理后,可以观察到更细微的化学结构变化,与对照组比较,氟中、高浓度组的差异以第1主成分因子为主,而氟低浓度组的差异以第2主成分因子为主,显示不同氟浓度对小鼠肝细胞核的化学结构影响存在明显差异。4.氟的遗传损伤及VC、VE干预作用的体外细胞培养实验研究：4.1细胞存活率随染氟浓度与时间的增加而下降。与对照组相比,F4组细胞存活率显著下降(P<0.05)。16h各处理组细胞存活率均低于2h处理组(P<0.05)。4.2淋巴细胞染氟4h后,(1)总凋亡率随染氟浓度增加而升高,与对照组相比,总凋亡率分别增加了2.47%、9.80%、13.52%、25.74%,除F1浓度组外,其余各组增加均有统计学意义(P<0.05)；(2)与对照组相比,随着NaF染毒浓度的升高,拖尾细胞数增加,彗星头部变小,亮度增加,彗尾变长变圆,荧光强度增强,其尾部DNA百分率、尾长、Olive尾矩升高呈剂量依赖性(P<0.01)；(3)端粒酶含量随染氟浓度增加而升高。与对照组相比,F3、F4浓度组端粒酶含量升高有统计学意义(P<0.05),且F4浓度组端粒酶含量明显高于其余各组(P<0.01)。4.3经预防性干预后的各组与F4组比较,(1) VC、VE、VC+VE各干预组淋巴细胞存活率均有升高的趋势。VC各组淋巴细胞存活率随着浓度的增加而升高,其中VC3+F4组细胞存活率升高有统计学意义(P<0.05),联合作用VC2+VE2+F4组细胞存率升高最显著(P<0.05)；(2)VC、VE、VC+VE各干预组淋巴细胞总凋亡率均有降低的趋势。VC、VE各干预组淋巴细胞总凋亡率随着浓度的增加而降低,VC2+F4、VC3+F4、 VE3+F4组淋巴细胞总凋亡率降低有统计学意义(P<0.05)。单纯VC、VE各总凋亡率低于VC+VE各干预组,但无统计学差异(P>0.05)；(3)VC、VE、VC+VE各干预组彗星头部变大,彗尾变短,尾部DNA百分率、尾长、Olive尾矩均显著降低(P<0.01),VE1组的Olive尾矩最短。VC+VE干预组均高于VC、VE各组尾部DNA百分率、尾长和Olive尾矩(P<0.05)；(4)VC、VE、VC+VE各干预组淋巴细胞端粒酶含量均有降低。VC、VE各组淋巴细胞端粒酶含量随着浓度的增加而降低,VC3+F4、VE3+F4浓度组淋巴细胞端粒酶含量降低有统计学意义(P<0.05)。 VC+VE各干预组以VC2+VE2+F4、VC3+VE3+F4组淋巴细胞端粒酶含量降低有统计学意义(P<0.05),且VC2+VE2+F4浓度组降低更显著(P<0.01)。结论在本研究条件下,1.职业性氟接触组女性肿瘤发病率升高,肿瘤发病年龄提前,氟可能是一种潜在的致癌物。2.氟可致实验动物小鼠染色体畸变、RNA/DNA结构的改变和体外培养人淋巴细胞细胞凋亡、DNA损伤、端粒酶含量升高,具有明显的遗传损伤效应,可能与肿瘤发生有关。3.在一定剂量范围内,VC、VE对氟致淋巴细胞损伤有明显的干预作用。4. ATR-FTIR可敏感地检测环境污染物引起的RNA、DNA.蛋白质等物质的改变,可作为早期遗传损伤监测的方法之一。