作为典型的急性期蛋白,天然人C-反应蛋白（C-reactive protein,CRP）主要由肝脏合成和分泌,它由五个相同的亚基通过非共价键形成盘状的五聚体结构。在炎症或组织损伤后的48小时内,其在血浆中的浓度可从基础水平的1μg/ml迅速升高1000多倍,由于CRP血浆浓度与炎症之间的相关性,使得CRP被用作衡量或监视体内的感染、组织损伤以及某些炎症疾病的发展,尤其是作为心血管疾病预测和愈后评价的标志分子受到广泛的关注。然而,更多的体外证据表明,CRP不仅作为标志分子,还通过构像变化形成单体CRP（monomeric CRP,mCRP）直接参与炎症反应,但是五聚体CRP（pentameric CRP,pCRP）和单体CRP在体内的作用仍存在矛盾,这是因为在体内复杂环境下CRP的变构为实验结果增加了复杂性,因此,构建只存在某一种CRP构型的实验动物对于研究CRP的病理生理学作用有重要意义,而这需要对CRP在细胞内的折叠、组装和分泌机制进行深入研究。在细胞内,野生型CRP只能以五聚体的形式分泌表达,这与体内CRP的表达情况一致,表明CRP亚基只有组装成五聚体才能通过细胞质控体系的监视进入分泌途径。我们通过构建突变体Y40C/V117C,发现其能够形成五聚体并分泌表达,进一步分析发现该突变体能够在保留天然二硫键的情况下,在亚基间形成一个二硫键,这表明CRP亚基的折叠过程发生于五聚体组装之前,只有当亚基折叠成近似天然构像后,才能进一步组装成五聚体,这与pCRP在脲变性溶液中解聚形成mCRP的过程中,CRP五聚体依赖于亚基三级构像的结果相一致。从二硫键突变体、Ca²⁺位点突变体、离子键突变体的表达和互作研究结果,我们推测CRP亚基的折叠过程大致分为两个主要阶段,首先,CRP从N-端开始折叠,使疏水核心结构形成,相距较远的Cys36和Cys97相互靠近并通过形成二硫键起到稳定疏水核心的作用,二硫键形成后,Ca²⁺参与亚基的进一步折叠,使其接近天然亚基的构像。在亚基的折叠过程中,DnaK和GroEL是参与肽链折叠的主要分子伴侣,在他们的帮助下,亚基的三级构像基本形成,但此时的亚基仍不能进入组装阶段,可能需要肽脯顺反异构酶的参与,通过对保守的脯氨酸的异构,实现局部区域的微调,使亚基进一步紧密包装,才能进入五聚体的组装过程。