【摘 要】
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本研究旨在探索HBV S/HEV ORF2融合基因在植物中表达乙肝戊肝双价抗原的可能性,以期为进一步研制植物乙肝戊肝双价口服疫苗打下基础。 应用重组PCR技术将乙肝病毒(HBV)S基
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本研究旨在探索HBV S/HEV ORF2融合基因在植物中表达乙肝戊肝双价抗原的可能性,以期为进一步研制植物乙肝戊肝双价口服疫苗打下基础。
应用重组PCR技术将乙肝病毒(HBV)S基因连接在戊肝病毒(HEV)ORF2部分序列的5’端,二者通过柔性肽(Gly<,4>Ser)<,2>序列相连,构建成融合基因BE,测序结果正确。
将融合基因BE克隆到植物双元表达载体pBin438上,获得pBin438BE,然后用冻融法将其转入根癌农杆菌EHa105中,侵染丽春番茄子叶和下胚轴,经预培养、共培养、筛选培养、生根培养获得了5株抗卡那霉素的番茄植株。提取抗性植株基因组DNA,进行PCR及PCR-Southern检测,4株获得阳性信号。初步表明目的基因已整合到了番茄基因组中。
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