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睡眠中癫痫性电持续状态（electrical status epilepticus during sleep,ESES）是一种特殊的脑电图（electroencephalography,EEG）现象,表现为慢波睡眠期持续性的棘慢波发放,可见于多种癫痫综合征,其中最常见的为ESES相关综合征。该综合征是一个涉及认知行为功能损害的疾病谱,从最良性的一端至最恶性的一端依次是儿童良性癫痫伴中央颞区棘波（benign childhood epilepsy with centro-temporal spikes,BECT）、BECT 变异型、Landau-Kleffner 综合征（Landau-Kleffner syndrome,LKS）和癫痫伴慢波睡眠期持续棘慢波（epilepsy with continuous spike-wave during slow-wave sleep,CSWS）。这部分患者在临床实践中并不少见,可表现出不同类型的癫痫发作和不同程度的认知障碍或退化（包括语言、阅读、注意力、记忆力等方面的障碍）;有一部分患者伴有难治性癫痫,有一部分遗留永久性认知障碍,其社会活动和生活质量会受到一定的影响,也给社会和家庭带来了较严重的负担。ESES相关综合征具有复杂的病因,结构性的、免疫性的以及遗传学的因素都有报道。有关遗传学的病因研究是目前的热点,包括单基因的突变和拷贝数变异（copy numbervariations,CNV）。基于单卵双胞胎发病情况不一的报道,以及多个遗传学研究结论一致性不高的特点,也提示这一疾病谱具有复杂的遗传模式和遗传异质性。二代测序技术的发展,有助于发现与疾病相关的未知基因,借助生物信息学的方法也有助于进一步筛选候选基因,通过对患者遗传学病因的研究,可以探讨发病机制、研制新药和实行个体化治疗。甲泼尼龙冲击治疗在国内外被广泛应用于治疗ESES,但在临床实践中部分患者对这项治疗并不敏感,用药后也会出现较明显的不良反应,为了实现更精准的个体化治疗,本研究将从患者的临床特征、实验室指标、候选基因等方面分析有可能影响疗效的因素。第一部分甲泼尼龙冲击治疗睡眠中癫痫性电持续状态的疗效及预后的研究研究目的:分析甲泼尼龙冲击治疗对儿童睡眠中癫痫性电持续状态的疗效及探讨影响疗效的相关临床指标。研究方法:2016年1月至2019年12月共纳入了 52例临床病例,其中BECT变异型34例,CSWS 14例,LKS 4例,平均随访时间为2年8月。分别观察甲泼尼龙冲击治疗对患者癫痫发作控制及脑电图ESES现象改善的情况,并记录治疗过程中的不良反应以及远期复发的情况。根据甲泼尼龙治疗ESES的疗效将患者分为有效组和无效组,比较两组发病年龄、性别、发病至甲泼尼龙冲击治疗的时间间隔、综合征类型、抗癫痫药物（Anti-Seizure Medication,ASM）使用情况、甲泼尼龙冲击的方法、冲击前的脑电图放电指数、血清细胞因子水平等指标,分析可能影响疗效的因素。研究结果:（1）甲泼尼龙冲击治疗对BECT变异型、CSWS、LKS患儿癫痫发作控制的有效率分别为73.5%、64.3%、75%。（2）甲泼尼龙冲击治疗对BECT变异型、CSWS、LKS患儿脑电图棘慢波指数（spike-wave index,SWI）的有效率分别为70.5%、50%、50%。（3）甲泼尼龙冲击治疗中有部分患儿出现高血糖、高血压、精神症状、头痛、感染、库欣面容等不良反应。随访1年以上,有33.3%的ESES治疗有效的患儿出现复发。（4）治疗前有效组和无效组的各项相关临床指标及血清细胞因子水平的差异均无统计学意义（P＞0.05）。研究结论:甲泼尼龙冲击治疗对儿童睡眠中癫痫性电持续状态有效,但也有一些不良反应的存在,约1/3的患者会出现远期复发。目前常见的临床指标及血清细胞因子并不能很好地预测甲泼尼龙冲击治疗的疗效。第二部分甲泼尼龙冲击治疗睡眠中癫痫性电持续状态的疗效相关基因的筛选研究研究目的:筛查ESES相关综合征患儿的候选基因,并进一步筛选和初步分析与甲泼尼龙冲击治疗的疗效有关的基因。研究方法:纳入了第一部分研究中的32例给予甲泼尼龙冲击治疗的ESES相关综合征患儿,包括1例LKS、6例CSWS和25例BECT变异型。记录了所有患儿的临床病史、个人史、家族史、体格检查、视频脑电图监测、磁共振成像、认知功能评价和治疗及随访情况,建立了临床生物信息数据库。收集患儿及其父母的静脉血,进行全外显子测序（wholeexome sequencing,WES）及拷贝数变异检测,筛选出可能的候选基因。其中1例有家族史的患儿同时采集了其患病祖父的静脉血进行全外显子测序及CNV检测,通过亲属间的比对分析找出可能的致病基因。综合基因有关的各种信息进行分析和标准化排序,得到每个患儿分值最高的候选基因,分析与疗效的关系。将研究中对甲泼尼龙冲击治疗有效的患儿所筛选获取的候选基因进行京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析。研究结果:（1）检出102个可能的候选基因,共132个突变,其中错义突变111个,移码突变10个,无义突变2个,缺失突变4个,插入突变3个,经典剪切位点突变2个。有106（80.3%）个突变为新发现的突变。6个基因的突变为新生突变,分别是 KCNA2、KCND3、TSC2、NPRL3、TRIO 及 CACNA1H。（2）在这102个基因中,与既往报道的致病/候选基因一致的有14个,分别是KCNA2、KCNQ2、KCNB1、KCNT1、SCN3A、SCN9A、PRRT2、BSN、SLC6A1、NID2、SRPX2、TSC2、RBFOX3、RELN,但没有发现相同的变异。（3）在筛选出的132个突变中,有15个患儿的16个突变ACMG评级为致病或可能致病,其中14个突变为可能致病,2个突变提示致病。根据统计学分析,ACMG可能致病和致病的突变的检出情况与患者癫痫的严重程度无关。（4）在这102个候选基因中,CACNA1A基因的突变在4个患儿中重复出现,TSC2、HECW2等6个基因的突变在3个患儿中重复出现,PRRT2、RELN等12个基因的突变在2个患儿中重复出现。（5）所有患儿的CNV检测结果为阴性,未发现有致病意义的拷贝数变异。（6）在有家族史的1例患儿和他祖父的测序结果中各筛查出若干个突变的基因,通过比对,二者携带的与癫痫发病有关的基因突变仅有PRRT2基因的错义突变（c.236C＞T）,患儿父亲未发病但携带与患儿相同的突变,母亲未检出该基因的突变。（7）对甲泼尼龙冲击有效的患儿所有筛查获取的候选基因进行KEGG通路的分析,最显著富集的是 GABA 能通路,SLC6A1、NSF、CACNA1B、CACNA1A、CACNA1D、CACN1C、GABRD这7个基因富集在该通路上。（8）通过标准化排序,患儿得分最高的突变基因有KCNA2、PRRT2、HECW2、RELN、TSC2等。有部分患儿得分最高的突变基因与GABA能通路相关,如SLC6A1、NSF、CACNA1A、CACNA1C,携带这些基因突变的患儿均对甲泼尼龙冲击治疗敏感。携带RELN、KCNA2、KCND3等基因突变的患儿,甲泼尼龙冲击治疗也有较好的疗效。研究结论:通过对32例ESES相关综合征患儿的全外显子测序,我们发现了PRRT2的一个热点突变c.649dupC与ESES的致病有关,同时发现了 PRRT2和KCNA2基因的新突变—c.236C＞T和c.1238T＞A可能致病。并筛选了一些新的候选基因,包括 HECW2、KIF1A、NPRL3、NSF、CHD2、CACNA1A 和 CLCN2 等。KEGG通路分析提示对甲泼尼龙冲击治疗有效的患儿的候选基因最显著富集在GABA能通路。这些发现将有助于探索ESES的发病机制和治疗靶点。