【摘 要】
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目的:通过制备新生SD大鼠痉挛型脑瘫模型,探讨乙酰左旋肉碱联合康复训练对痉挛型脑瘫模型鼠的运动功能以及炎症反应的影响。方法:选取足月7日龄新生SD大鼠150只,采用随机数字表法分为正常对照组（NS组,n=30）和模型组（M组,n=120）。于7日龄对M组仔鼠左侧颅内锥体束定向注射无水乙醇（1μL/g）,NS组于左侧颅内锥体束定向注射等量生理盐水。各组大鼠均在注射24 h后（8日龄）,采用改良李晓捷
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目的:通过制备新生SD大鼠痉挛型脑瘫模型,探讨乙酰左旋肉碱联合康复训练对痉挛型脑瘫模型鼠的运动功能以及炎症反应的影响。方法:选取足月7日龄新生SD大鼠150只,采用随机数字表法分为正常对照组（NS组,n=30）和模型组（M组,n=120）。于7日龄对M组仔鼠左侧颅内锥体束定向注射无水乙醇（1μL/g）,NS组于左侧颅内锥体束定向注射等量生理盐水。各组大鼠均在注射24 h后（8日龄）,采用改良李晓捷等鉴定脑瘫模型的标准结合Longa评分法判定痉挛型脑瘫仔鼠模型。将M组造模失败的SD大鼠剔除,造模成功的SD大鼠随机分为M1、M2、M3组,每组30只。造模当日记为实验第0天,于实验第1天（8日龄）开始干预,M2组给予皮下注射ALCAR（100μg/g）,M3组给予皮下注射等量ALCAR并联合康复训练,M1组和NS组给予皮下注射等量生理盐水。7天为1个疗程,干预2个疗程（至21日龄）。于8、14、21日龄进行神经行为学检测观察干预前后的神经行为学及运动功能的改变,应用HE染色动态观察脑组织形态学的改变,应用IBA-1免疫组化染色检测小胶质细胞的形态,应用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测海马组织IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白的表达。结果:1.模型鉴定结果显示,8日龄M组仔鼠共判定痉挛型脑瘫模型98只,NS组无痉挛型脑瘫仔鼠。2.神经行为学及运动功能检测结果:M2、M3组仔鼠的Longa评分法、姿势反射试验、肌张力检测、倾斜板试验、悬吊试验、步行活动表现随日龄的增长逐渐变好（P＜0.05）,M3组优于M2组（P＜0.05）,M1组无明显变化（P＞0.05）,NS组除悬吊试验（P＜0.01）,其他行为学表现均无明显变化（P＞0.05）。3.HE染色结果显示:NS组各日龄仔鼠脑组织形态学未见明显的病变;M1、M2、M3组各仔鼠脑组织结构破坏,可见较明显的细胞坏死,神经胶质细胞增生,21日龄优于8、14日龄,脑组织无明显的成片细胞死亡现象,细胞排列相对整齐,但仍存在炎性细胞浸润。4.IBA-1免疫组化染色结果:（1）同日龄、不同组比较:M1、M2、M3组各日龄仔鼠活化的小胶质细胞数量多于NS组（P＜0.05）,14、21日龄,M1组IBA-1表达多于M2、M3组（P＜0.05）,但M2与M3组比较无显著性差异（P＞0.05）。（2）同组别、不同日龄比较:NS组各日龄IBA-1表达比较无显著性差异（P＞0.05）;M2、M3组8日龄明显多于14、21日龄（P＜0.01）,且14日龄多于21日龄（P＜0.05）;M1组8日龄IBA-1的表达高于14、21日龄（P＜0.05）。5.ELISA检测结果:（1）同日龄、不同组比较:M1、M2、M3组各日龄仔鼠海马组织IL-1β、IL-6和TNF-α表达均高于NS组（P＜0.05）,M2、M3组较M1组降低（P＜0.05）,但M2与M3组比较无显著性差异（P＞0.05）。（2）同组别、不同日龄比较:14、21日龄M2、M3组海马组织IL-1β、IL-6和TNF-α表达均低于8日龄（P＜0.05）;14日龄M3组仔鼠IL-6和TNF-α表达水平高于21日龄（P＜0.05）,14日龄的M2、M3组IL-1β表达高于21日龄（P＜0.05）。结论:1.脑立体定位锥体束注射无水乙醇可成功制备痉挛型脑瘫仔鼠模型。2.痉挛型脑瘫模型鼠中,ALCAR及联合康复训练可通过抑制小胶质细胞的活化,降低IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平来抑制脑组织海马区的炎症反应。3.ALCAR可改善痉挛型脑瘫模型鼠的运动功能,且ALCAR联合康复训练的疗效优于单独应用ALCAR。
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