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发菜是一种可食用陆生经济蓝藻,本文的主要目的是研究发菜细胞的开放式培养技术,为产业化打下基础。 选育了一株可在高碱性环境下(pH大于10)良好生长的发菜细胞株BC03-3,为发菜细胞的开放式培养奠定了基础。通过中心组合设计和响应面分析研究了培养基中氮源和磷源对BC03-3细胞株在高pH值下生长的影响,确定该细胞株在碱性环境下生长的最佳氮源和磷源浓度为硝酸钠2.00g/L,磷酸二氢钾0.96g/L,摇瓶培养最高产量可达0.887g/L。 进行25L容积的开放式培养试验,实验证明利用所筛选的BC03-3细胞株可以在高碱性环境下成功实现发菜细胞的单种培养。研究了发菜细胞在开放式培养池内的生长情况,初步确定光照周期、液位及通气量对于发菜细胞生长的影响。 对发菜细胞固态培养进行了初步研究,实验证明发菜细胞可以在固态沙粒上生长,并利用计算机视觉技术对发菜的形态图片进行数字化处理,结果表明其生长速度明显优于发菜藻体在沙粒上的生长速度。实验范围内沙粒直径<0.44mm、光照强度为20~45μmol/m/s、添加硝酸钠为氮源有利于发菜细胞在沙粒上生长。 从耐旱性及耐高温角度对固态培养的发菜细胞与液态培养的发菜细胞进行了比较,实验证明在固态基质上培养的发菜细胞比液体培养的发菜细胞具有更强的耐高温及耐干旱性。 发菜细胞固态培养可以增强土壤的渗水性及持水性,培养过程中可在沙粒表层形成生物结皮,因而可能有利于土壤性质的改良。 论文研究结果为实现发菜细胞的低成本大规模培养及野外种植奠定了基础。