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研究背景和目的：Gsdma3基因是Gsdm基因家族中位于小鼠第11号染色体的亚家族Gsdma基因家族成员之一，Gsdma基因家族成员同视黄酸受体α及角质蛋白1的编码基因紧邻。Gsdma3基因存在的热点突变区域能分别产生6种Gsdma3突变体，Bsk, Dfl, Rco2, Fgn,Rex-denuded和Rim3，这6种突变体在皮肤上皮组织中会引起毛囊周期中第一次生长期的延长，皮肤的过度增生，并使得皮肤产生炎症反应。经典Wnt／β-catenin信号通路对皮肤上皮细胞的增殖，分化具有重要的调节作用，而我们前期研究结果提示，Gsdma3基因同经典Wnt／β-catenin信号通路在小鼠皮肤上皮细胞中存在关联，所以本研究的目的在于:1、初步探明在小鼠皮肤上皮细胞中，Gsdma3基因对抑制经典Wnt/β-catenin信号通路的Wnt5a表达的影响。2、初步探明在小鼠皮肤上皮细胞中，Gsdma3基因对抑制经典Wnt/β-catenin信号通路的E-cadherin表达的影响。3、初步探明在小鼠皮肤上皮细胞中，Gsdma3基因对能够与β-catenin蛋白形成激活蛋白复合体的NF-κB蛋白表达的影响。方法：1、本研究利用C57BL/6J小鼠，Gsdma3基因突变鼠及Gsdma3基因表达质粒等材料，通过质粒转染、组织切片、免疫荧光、RT-PCR、WB等技术手段，在Gsdma3基因突变及突变挽救后，分析在体小鼠皮肤上皮细胞中，Gsdma3基因对Wnt5a，E-cadherin，NF-κB表达变化的影响情况。2、利用体外培养的小鼠皮肤上皮细胞和Gsdma3基因表达质粒，质粒转染、流式细胞术、免疫荧光、RT-PCR、WB等技术手段，在离体水平上分析了培养的小鼠皮肤上皮细胞Gsdma3基因过表达后，Gsdma3基因对Wnt5a，E-cadherin，NF-κB表达变化的影响情况。结果：1、在体水平上，免疫荧光结果显示，Gsdma3基因突变鼠皮肤上皮细胞中Wnt5a的表达上调；Gsdma3基因突变鼠进行Gsdma3基因表达挽救后，Wnt5a的表达下调。同样，在7周C57BL/6J小鼠毛囊周期同步化的背部皮肤上皮细胞中过表达Gsdma3基因后也会引起Wnt5a的表达下调。在离体水平上，RT-PCR, Western blot结果显示，在培养的小鼠皮肤上皮细胞中过表达Gsdma3基因后，Wnt5a的表达呈现下调趋势。2、在体水平上，免疫荧光，RT-PCR, Western blot结果显示，Gsdma3基因突变鼠皮肤上皮细胞中E-cadherin的表达在突变鼠中具有显著的上调现象；Gsdma3基因突变鼠进行Gsdma3基因表达挽救后，E-cadherin的表达下调。同样，在7周C57BL/6J小鼠毛囊周期同步化的背部皮肤上皮细胞过表达Gsdma3基因后也会引起E-cadherin的表达下调。在离体水平上，免疫荧光，RT-PCR, Western blot结果显示，在培养的小鼠皮肤上皮细胞中过表达Gsdma3基因后E-cadherin的表达具有显著的下调现象。3、在体水平上，免疫荧光，RT-PCR, Western blot结果显示，Gsdma3基因突变鼠皮肤上皮细胞中NF-κB的表达具有显著的上调现象。在离体水平上，免疫荧光，RT-PCR, Western blot结果显示，在培养的小鼠皮肤上皮细胞中过表达Gsdma3基因后NF-κB的表达具有显著的上调现象。结论：1、在小鼠皮肤上皮细胞中Gsdma3基因能抑制Wnt5a的表达。2、在小鼠皮肤上皮细胞中Gsdma3基因能抑制E-cadherin的表达。3、在小鼠皮肤上皮细胞中Gsdma3基因能促进NF-κB的表达。