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目的观察推拿后幼鼠脑白质内环状RNA mmu＿circ＿0001724的表达情况,探索其在推拿治疗脑瘫幼鼠中的作用与机制。方法将72只新生Sprague Dawley（SD）幼鼠按照随机数字表随机分为两组,每组36只。一组随机分为正常组（n=18）和假手术组（n=18）;另外一组采用左侧颈总动脉结扎联合缺氧法制备模型,所有模型于P1（造模当天记为P0以此类推P1、P2、P3……）进行翻正实验验证模型是否成功,除去死亡及造模失败的9只,余17只,将造模成功的幼鼠再次进行随机分组,推拿组（n=14）、模型组（n=13）,假手术组在造模当天切开左侧颈部皮肤,分离血管但不结扎、不进行缺氧处理。P1推拿组死亡1只,模型组死亡2只,为确保每组母鼠哺育幼鼠数量一致性,正常组、假手术组各随机剔除6只,即正常组（n=12）、假手术组（n=12）、模型组（n=11）、推拿组（n=13）。P0开始每日在相同时间点分别记录四组幼鼠的体重,并记录四组幼鼠P0、P7、P14、P21、P28五个时间点的身长及尾长;P1开始推拿干预,连续干预6天,休息一天,连续干预四周,其余三组不予推拿干预,仅在推拿组推拿干预时做禁食处理;P24开始连续三天进行行为学训练,包括平衡木训练和步态分析训练;P27进行行为学考试,包括平衡木考试和步态分析考试,评价四组幼鼠的运动功能;P29即干预结束后1天处死四组幼鼠,断头取脑,分别取白质、大脑皮层置于1.5ml EP管中,经干冰转移至-80℃冰箱保存;使用电镜观察轴突的结构变化,计算g值（轴突内外径的比值）,比较四组幼鼠轴突髓鞘化程度;使用q PCR技术检测大脑白质内目的circ RNA的表达水平;使用WB检测幼鼠大脑皮层内的髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein,MBP）表达水平。所有数据使用IBM SPSS Statistics Version 26.0.0.0统计分析。结果1.四组幼鼠一般情况比较分别比较四组幼鼠P0、P7、P14、P21、P28五个时间点的体重,结果显示,从P7开始,假手术组和正常组的平均体重高于模型组;从P21开始推拿组平均体重均高于模型组,差异具有统计学意义。分别比较四组幼鼠P0、P7、P14、P21、P28的身长及尾长,结果显示从P7开始假手术组、正常组和推拿组的平均身长及尾长均长于模型组,差异具有统计学意义。2.四组幼鼠运动功能比较（1）四组幼鼠两后肢支撑时长比值比较（左后足比右后足）推拿组两后肢支撑时长比值平均为1.01±0.13,模型组两后肢支撑时长比值平均为1.17±0.11,假手术组两后肢支撑时长比值平均为1.01±0.12,正常组支撑时长比值平均为1.04±0.19。推拿组分别与正常组、假手术组比较,差异均不具有统计学意义,推拿组与模型组比较差异具有统计学意义（P<0.01）。（2）四组幼鼠两后足最大触地面积比值比较（左后足比右后足）推拿组两后足最大触地面积比值平均为1.01±0.14,模型组最大触地面积比值平均为1.18±0.1,假手术组最大触地面积比值平均为1.00±0.11,正常组最大触地面积比值平均为1.01±0.17。推拿组分别与正常组、假手术组比较,差异均不具有统计学意义,推拿组与模型组比较差异具有统计学意义（P<0.01）。（3）四组幼鼠平衡功能比较推拿组通过平衡木的平均时间为6.88±0.8,模型组通过平衡木的平均时间9.44±1.76,假手术组通过平衡木的平均时间5.55±0.65,正常组通过平衡木的平均时间5.42±0.65。推拿组分别与正常组、假手术组比较,差异均具有统计学意义（P<0.01）,推拿组与模型组相比较差异具有统计学意义（P<0.05）。3.四组幼鼠轴突髓鞘化水平比较推拿组髓鞘g值平均为0.76±0.07,模型组髓鞘g值平均为0.81±0.06,假手术组髓鞘g值平均为0.73±0.08,正常组髓鞘g值平均为0.72±0.06。推拿组分别与正常组、假手术组比较,差异均不具有统计学意义,推拿组与模型组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。4.四组幼鼠脑白质内circ RNAmmucirc0001724表达水平比较推拿组脑白质内circ RNAmmucirc0001724平均表达水平为1.65±0.39,模型组平均表达水平为1.87±0.61,假手术组平均表达水平为1.35±057,正常组平均表达水平为1.23±0.36。推拿组分别与正常组、假手术组比较,差异均不具有统计学意义,推拿组与模型组比较差异不具有统计学意义,模型组目的circ RNA平均表达水平高于正常组且差异具有统计学意义（P<0.05）。5.四组幼鼠MBP蛋白表达水平比较推拿组大脑皮层内MBP蛋白平均表达水平为0.86±0.22,模型组平均表达水平为0.41±0.2,假手术组平均表达水平为0.83±0.25,正常组平均表达水平为0.88±0.2。推拿组分别与正常组、假手术组比较,差异均不具有统计学意义,推拿组与模型组相比较差异具有统计学意义（P<0.01）。结论1.推拿可以促进CP幼鼠的生长发育,改善CP幼鼠的运动功能和平衡功能,实验结果与课题组前期实验结果一致。2.推拿可以改善少突胶质细胞轴突的髓鞘化程度,促进CP幼鼠脑白质的修复。3.推拿促进CP幼鼠脑白质修复的机制可能是通过下调CP幼鼠大脑白质环状RNA mmu＿circ＿0001724circ RNA的表达水平,上调MBP蛋白的表达,影响了mi RNA的功能状态而实现的。