广东野牡丹科植物种质资源的研究

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野牡丹科(Melastomataceae)观赏植物是近年来国际上新流行的花卉。全世界约240个属,3000余种。本科植物多为草本、灌木或小乔木,多数种类叶形奇特,花大艳美,可作为观赏植物应用于城市绿化,环境美化,但目前大多处于野生状态。本研究以分布于广东的野牡丹科植物为研究对象,从资源和遗传背景调查、野牡丹亚科植物系统发育研究、人工杂交遗传学分析和自然杂交的分子验证,并以银毛野牡丹(Tibouchina aspera)为例,研究野牡丹科优良品种组织培养和快繁体系的建立。主要研究结果如下:   采取野外调查和历史文献查阅方式,调查广东野牡丹科植物资源概况。结果表明,广东分布有14属57种9变种,分别占中国野牡丹科植物总属数的60%,总种数的35.68%;水平分布以粤北地区分布最多。垂直分布整体上呈先升后降的趋势,海拔800~1000m之间分布种类最多。广东野牡丹科植物具有较强的热带性质,主要为旧世界热带分布、西马来分布或西马来至东马来间断分布。而与邻近省区的比较,广西与广东野牡丹科植物资源最为丰富。另新加坡、巴西、台湾等地引进7种1变种,广东现有14属64种10变种。   建立野牡丹植物种质资源圃,观测12种具应用价值种类的物候。结果表明广东乡土野牡丹种类均能结种,引进的种类少部分能结种,大部分不结种。本土种类花期通常较短,约1-2个月。国外引种的8个种,花期多为半年以上。这可能与环境适应性及引进种多为观赏花卉定向培育有关。   采用根尖染色体制片技术,研究8种1变种野牡丹染色体数和核型分析,野牡丹属植物均为二倍体,2n=2x=24;蒂牡花(Tibouchina urvilleana)和银毛野牡丹的染色体数目为2n=3x=36,为三倍体植物;野牡丹属核型均属2B型。   野牡丹亚科植物系统发育的研究。用ITS序列,采用最大似然法、最大简约法(MP)和邻接距离法(NJ)分别构建了亚洲野牡丹亚科4族13属19种和美洲野牡丹亚科的7族16属30种的系统发育树。可分三大支,各大支均具有较高的bootstrap支持值。第一大支为来自于亚洲的野牡丹亚科类群,包括蜂斗草族,尖子木族和藤牡丹族的所有物种。第二大支包括野牡丹族和来自美洲的Rhexieae、Microliciaea族的物种。第三大支包括来自于美洲的Merianiaea族,Blakeae族和Micronieae族的物种。中国的野牡丹类群并没有形成自己的单系。   人工杂交遗传学分析。野牡丹属种间杂交较为容易,最高结实率可达71.4%。蒂牡花属和野牡丹属杂交不亲和。所有性状均具有较稳定的遗传表达能力。花径、株高、叶长、叶宽均是一种数量性状,且出现不同程度的超亲遗传。   采用蒂牡花和同属的银毛野牡丹、角茎野牡丹(Tibouchina granulosa)、巴西野牡丹(Tibouchina semidecandra)3种植物,测序核DNA ITS片段和叶绿体的trnL-trnF片段,并克隆蒂牡花核DNA ITS片段进行遗传分析,结果表明,蒂牡花是一个杂交种,银毛野牡丹或接近的种是蒂牡花的亲本。作为入侵种的蒂牡花,具有营养生长快速的特性,可能源自它的杂交优势,这为入侵植物的防治提供了启迪。   采用两个低拷贝的核基因cam和gapC和叶绿体trnL-trnF基因间隔区序列,并用细叶野牡丹(Melastoma intermedium)以及它的嫌疑亲本野牡丹(Melastoma candidum)和地稔(Melastoma dodecandrum)的多个个体进行研究。结果表明,这两个种都可以作为细叶野牡丹的母本,证实了细叶野牡丹是上述两种的杂交种,且杂交是双向的。   以银毛野牡丹为例,开展优良品种组织培养和快繁体系建立。利用银毛野牡丹幼嫩叶片为接种外植体,先经30 d暗培养。TDZ是诱导不定芽因素中的关键因子,MS+2.5μMTDZ能诱导愈伤组织,增殖培养基MS+5.0μM BA+1.0μMNAA45 d后增值系数达10.9。TDZ和NAA配合使用,不定芽的诱导率提高,MS+2.5μM TDZ+1.0μM NAA,平均芽数达9.6。在1/2MS+0.5μMIBA或0.5μM IBA+0.5μM NAA培养基可诱导根的形成。  
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