论文部分内容阅读
目的 研究血吸虫感染不同时期小鼠肝组织外周型苯二氮卓受体(PBR)表达水平，及中药黄芪对PBR表达的调控作用。以探讨PBR与血吸虫病肝损伤之间的关系，进一步阐明黄芪保肝、抗肝纤维化机理。 方法 1、BALB／C系雄性小鼠，16-18g，76只，随机取出58只，经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴，每只人工感染尾蚴25条。 2、将未感染血吸虫尾蚴的健康小鼠作为一组，即A正常组(18只)小鼠不感染，以普通小鼠饲料喂养，并于8周、12周、20周分别剖杀6只小鼠，取其肝脏，作为正常对照。 3、将感染了血吸虫尾蚴的58只小鼠随机分成三组，即B感染组(30只)感染后小鼠在相同条件下喂养，并于8周、12周、20周分别剖杀10只小鼠，取出其肝脏。C黄芪治疗组(16只)感染后小鼠在相同条件下喂养，并于8周后开始每鼠每天腹腔注射黄芪注射液，0.2ML／只，在12周、20周分别剖杀8只小鼠，取其肝脏。D生理盐水对照组(12只)感染后小鼠在相同条件下喂养，并于8周后开始每鼠每天腹腔注射生理盐水注射液，0.2ML／只，在12周、20周分别剖杀6只小鼠，取其肝脏。 4、将上述四组小鼠取出的肝组织，一部分置于10％的中性甲醛中固定，做石蜡包埋后，制成5UM的连续切片，进行组织病理观察。一部分直接置于低温冰箱，-70℃保存，用于荧光定量PCR(FQ-PCR)，测PBR-mRNA的量。 结果 1、组织病理学观察 感染血吸虫尾蚴的小鼠，8周肝组织已形成虫卵肉芽肿病变，汇管区结缔组织增生，炎症反应强烈，部分肉芽中心出现坏死，形成嗜酸性脓肿；12周时，肝内汇管区及虫卵肉芽肿周围可见明显的纤维增生，较多的慢性虫卵肉芽肿病灶已纤维化；20周时，汇管区可见大量的纤维疤痕病灶，邻近的肝细胞浊肿变性，血窦明显被压迫。而正常对照组小鼠肝组织形态、结构完整，未见任何病变。黄芪治疗组小鼠，汇管区及虫卵肉芽肿内纤维增生有所减轻，肝组织内炎性反应也有改善。 2、PBR的表达量 在8周，感染组小鼠较同期正常组小鼠，肝组织PBR的表达量显著增加(P＜0.05)。在12周、20周的感染组小鼠较同期正常组，肝组织PBR表达量亦显著增加(P＜0.01)。且感染组不同时期之间比较，其PBR的表达量也逐渐增加(P＜0.01)。而不同时期正常组PBR的表达，无显著性差异(P＞0.05)。 黄芪治疗组小鼠较同期感染组小鼠，其肝组织PBR的表达明显减少(P＜0.01)。而生理盐水对照组小鼠较同期感染组小鼠，其肝组织PBR的表达无显著性差异(P＞0.05)。黄芪治疗组小鼠较同期生理盐水对照组小鼠，其肝组织PBR的表达明显减少(P＜0.01)。而黄芪治疗组小鼠较同期正常组小鼠间，其肝组织PBR的表达亦无显著性差异(P＞0.05)。结论 1、在血吸虫感染小鼠肝损伤过程中，其肝组织PBR表达量显著增加，且随感染时间延长而增加，PBR表达量与肝损伤程度同步。 2、黄艺能降低血吸虫性小鼠肝组织的PBR表达量，可能通过这一机制阻抑血吸虫肝病的发展。