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目的观察大蒜提取物二烯丙基二硫(DADS)对MCF-7和MDA-MB-231两种人乳腺癌细胞侵袭迁移的影响,探讨p38/TTP是否参与DADS对乳腺癌调节这一机制,为乳腺癌的分子靶向治疗提供新的理论依据。方法1.分别用不同浓度(50μmol/L,100μmol/L,200μmol/L,400μmol/L,600μmol/L)的DADS处理MCF-7和MDA-MB-231细胞,平板克隆法观察DADS对细胞克隆形成能力的影响。2.筛选100μmol/L,200μmol/L,400μmol/L DADS处理两种乳腺癌细胞,Transwell侵袭及划痕愈合实验检测DADS对乳腺癌细胞侵袭迁移的影响,western blot检测侵袭迁移相关蛋白uPA、MMP9以及p38、P-p38和TTP的表达变化。进一步采用200μmol/L DADS分别处理两种细胞6,12,24和48h,进行上述western blot检测。3.选择DADS处理两种乳腺癌细胞的浓度和时间分别为200μmol/L和24h,运用SB203580和TGF-β1调节p38信号,Transwell和划痕愈合实验观察调节p38信号对DADS抑制细胞侵袭迁移的影响,western blot检测uPA、MMP9、p38、P-p38、TTP表达的变化,免疫荧光法观察P-p38表达改变。4.TTP siRNA转染细胞沉默TTP表达,Transwell和划痕愈合实验观察DADS对细胞侵袭迁移能力的改变,western blot检测TTP、uPA和MMP9表达的变化。结果1.平板克隆结果显示,DADS可抑制两种乳腺癌细胞克隆的形成,进而筛选100μmol/L,200μmol/L,400μmol/L DADS处理两种乳腺癌细胞。2.Transwell及划痕愈合实验表明,随着处理浓度的增加,DADS抑制细胞侵袭迁移的能力逐渐增强。Western blot结果发现,DADS可下调侵袭迁移相关蛋白uPA、MMP9的表达,且下调P-p38,上调TTP表达,均具有浓度和时间依赖性。3.用TGF-β1预处理细胞上调P-p38表达,可延缓DADS对乳腺癌细胞侵袭迁移的抑制作用和对TTP表达的上调效果;而p38阻断剂SB203580预处理细胞,则可加强DADS的上述作用。4.TTP siRNA可沉默TTP表达,延缓DADS的上述作用。结论1.DADS抑制MCF-7和MDA-MB-231两种乳腺癌细胞侵袭迁移;2.DADS可通过p38/TTP途径下调侵袭迁移相关蛋白u PA和MMP9的表达抑制乳腺癌细胞的侵袭迁移。