目的:探讨在T系急性白血病的Jurkat细胞中,GPI锚固蛋白CD59通过接头分子LAT介导细胞的增殖、活化、凋亡等生物学效应,研究GPI类锚固分子CD59介导T细胞信号转导的作用机制。方法:分别构建LAT-EGFP(LAT组,LAT分子高表达)、LAT-M-EGFP(LAT-M组,LAT分子的棕榈酰化位点突变)、neg-EGFP(neg组,阴性对照组)融合蛋白,以慢病毒为载体,转染入Jurkat细胞中,建立稳定表达的细胞株。CD59单克隆抗体交联刺激CD59分子前后,利用激光共聚焦显微镜观察CD59和LAT分子在细胞膜上的定位和分布情况;利用CCK8和流式细胞术检测各组细胞的增殖活性和凋亡情况;通过电镜观察各组细胞中细胞器的变化情况;利用q RT-PCR和Western blot在m RNA和蛋白水平检测T细胞信号转导通路中相关信号分子的表达情况。结果:共聚焦显微镜下观察到各组细胞的转染效率均在80%以上,转染细胞株构建成功。LAT组中,CD59和LAT分子均表达于细胞膜上且部分LAT分子有点簇状聚集区-脂筏所在部位;CD59单克隆抗体交联刺激后,CD59和LAT的点簇状聚集区更为明显且共同定位于脂筏。LAT-M组中,LAT分子在细胞膜上散在分布,未出现点簇状聚集区;CD59抗体作用后无明显变化。与阴性对照组相比,LAT组的细胞增殖活性最高且出现明显的中晚期凋亡现象,LAT-M组细胞的增殖活性最低,中晚期凋亡率最高;CD59抗体作用后,LAT组和neg组细胞增殖活性均明显增高,neg组细胞凋亡减少,LAT组无明显变化,LAT-M组细胞凋亡增加。在基因水平上,LAT组的表达高于neg组和LAT-M组,CD59抗体交联刺激后,LAT组无明显变化,neg组和LAT-M组均较刺激前有所增加。Western blot结果显示,CD59抗体交联后,LAT组和neg组的非磷酸化蛋白表达水平均明显降低,LAT-M组无明显变化。结论:GPI锚固蛋白CD59通过跨膜接头蛋白LAT对T细胞信号转导发挥调控作用,且LAT的棕榈酰化是其发挥功能所必需的。这为其它GPI类锚固分子信号转导的机制研究提供了新视野和新方向。