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背景及目的: 周围神经损伤是临床医生比较棘手的疾病,最严重的类型是神经完全断裂,导致其支配区域功能减退、丧失以及持续的病理性疼痛。受损神经再生的速度十分缓慢,并且受损区域与周围组织易形成粘连,预后较差。目前,传统的缝线缝合是治疗神经损伤的主要方法,然而,缝合后神经后期功能恢复的效果仍不尽如人意。因为,缝合造成了二次损伤,缝线作为异物可引起慢性的炎症,并导致疤痕的形成,影响治疗效果。近年来一种新的免缝合组织粘合技术称为光化学反应组织粘合技术(Photochemical Tissue Bonding,PTB)已经在修复皮肤、血管、跟腱等组织中取得成功。有研究报道PTB技术可以与生物材料协同治疗坐骨神经损伤,其神经再生的情况及后期功能恢复均有显著提高,并且优于单一的PTB技术及缝合法。肠衣(small intestinal submucosa,SIS)做为新型的生物材料,因其无免疫原性、促进组织增殖分化等诸多优点而广泛应用于组织修复的研究。本实验通过肠衣协同PTB以及单一的PTB技术治疗大鼠离断的坐骨神经,以传统的外膜缝合法作为对照,观察并比较三种方法的治疗效果,探索一种新的免缝合技术可以用于修复损伤的坐骨神经。 方法: 1、离体实验(选取合适的光照剂量):取18条WISTAR大鼠坐骨神经,完全离断后随机分为三组,每组坐骨神经断端用肠衣包裹,覆盖光敏剂RB后分别以25J/cm2、50J/cm2、100J/cm2的532nm波长的激光照射;之后采用张力检测器分别对各组处理后的坐骨神经进行张力值检测,从而比较各组肠衣与神经组织的黏附性。 2、在体实验(光化学免缝合技术修复周围神经的实验研究):应用8周龄雄性WISTAR大鼠54只,制备坐骨神经完全离断的损伤模型后即刻以10-0缝线(缝合组,n=18)外膜缝合、PTB技术(n=18)、PTB技术+肠衣(PTB+肠衣组, n=18)处理离断的坐骨神经。以缝合组作为对照组,术后比较三组动物损伤神经区域粘连、炎性反应和疤痕形成情况;比较S100蛋白的表达;称重腓肠肌并计算比率比较肌肉萎缩的程度;通过坐骨神经功能指数(SFI)评估神经功能的恢复。 结果: 1、离体实验:100J/cm2实验组张力值较50J/cm2、25J/cm2实验组高,比较差异有显著统计学意义(P<0.01);50J/cm2实验组与25J/cm2实验组张力值比较差异无统计学意义。 2、在体实验:缝合组术后12周可见受损神经与周围广泛粘连,PTB组略轻,PTB+肠衣组未见粘连组织;缝合组术后3天He染色见明显炎性细胞侵润,12周可见明显粘连组织形成;PTB组及PTB+肠衣组炎性反应较轻并且未见粘连组织形成;术后12周免疫组化结果可见三组S100表达均为阳性,但PTB及PTB+肠衣组S100阳性表达面积高于缝合组;术后12周PTB及PTB+肠衣组腓肠肌称重比率高于缝合组,比较差异有统计学意义(P<0.05);术后4周三组SFI比较差异无统计学意义,术后8周、12周PTB组SFI高于缝合组(P<0.05),PTB+肠衣组SFI高于缝合组及PTB组,比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。 结论: PTB技术可用于修复坐骨神经损伤,相比于传统的缝合法,PTB技术可减轻组织粘连、炎症反应及疤痕形成,促进功能的恢复;PTB+肠衣修复效果优于缝合法及单一的PTB技术。