【摘 要】
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克虏伯样因子（Krüppel-like factors,KLFs）是一种高度保守的锌指蛋白家族,参与哺乳动物的早期胚胎发生、器官发生、疾病发生等多种生理过程。锌指蛋白267（zinc finger protein 267,ZNF267）是该家族成员之一,主要调控细胞增殖、分化、应激等过程,并与多种疾病的发生密切相关,如阿尔兹海默症、白血病、胰腺癌、肝癌、弥漫大B细胞淋巴瘤等。生物信息数据库GEPI
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81272377）； 安徽省高等学校自然科学研究项目（KJ2020B22）；
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克虏伯样因子（Krüppel-like factors,KLFs）是一种高度保守的锌指蛋白家族,参与哺乳动物的早期胚胎发生、器官发生、疾病发生等多种生理过程。锌指蛋白267（zinc finger protein 267,ZNF267）是该家族成员之一,主要调控细胞增殖、分化、应激等过程,并与多种疾病的发生密切相关,如阿尔兹海默症、白血病、胰腺癌、肝癌、弥漫大B细胞淋巴瘤等。生物信息数据库GEPIA、UALCAN和CCLE提供的信息显示,ZNF267在乳腺癌细胞及组织中表达高于正常细胞和癌旁正常组织,且高表达患者生存率较低。有关ZNF267在乳腺癌细胞生长和转移中的功能,迄今未有研究报道。本研究通过在乳腺癌细胞中过表达ZNF267,探索该基因与乳腺癌细胞转移的关系。结果如下:1.成功克隆出ZNF267的CDS序列,构建p EB-3×flag-ZNF267慢病毒过表达质粒,包装p EB-3×flag-GP和p EB-3×flag-ZNF267质粒慢病毒,分别成功转染乳腺癌细胞（SUM159和MCF-7）。q RT-PCR和Western Blot结果显示,ZNF267过表达乳腺癌细胞株（SUM159-ZNF267和MCF-7-ZNF267）构建成功。2.MTT和细胞克隆形成实验表明,ZNF267过表达能够提高乳腺癌细胞的增殖活力和其成瘤性。3.细胞划痕和Transwell迁移实验表明,ZNF267过表达明显促进了乳腺癌细胞迁移。4.Transwell侵袭实验表明,ZNF267过表达提高了乳腺癌细胞的侵袭能力。5.对乳腺癌细胞（SUM159-ZNF267/SUM159-GP和MCF-7-ZNF267/MCF-7-GP）进行转录组测序,分别鉴定出243和1225个差异表达基因,其中13个是两组共有,它们是SLC6A12、DHRS2、GALNT9、S100A9、OLFM1、ACTL10、TMEM8B、FER1L4、GPNMB、CAPN12、VLDLR、STS和RAB3B。经GO功能注释和KEGG通路富集分析,发现ZNF267过表达后,富集差异表达基因主要参与的代谢通路有细胞粘附分子途径、c AMP信号通路、GABA能突触通路、Rap1信号通路、胆固醇代谢通路、PI3K-AKT信号通路等,从而揭示了ZNF267通过参与多种信号通路影响乳腺癌细胞转移。综上,ZNF267过表达促进了乳腺癌细胞转移,为乳腺癌分子靶向治疗提供了新思路。
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