星形胶质细胞缝隙连接通讯对深部脑白质低灌注损伤的影响

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:killall2009
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目的:研究小鼠BCAS造模后不同时间,脑白质髓鞘相关蛋白MAG、MBP的表达量的改变,特异性敲除星形胶质细胞connexin43对小鼠脑白质低灌注损害的影响,少突胶质细胞增殖分化的不同。方法:根据Cre-lox P技术获得星形胶质细胞connexin43敲除的C57小鼠,利用双侧颈总动脉狭窄技术建立其脑白质低灌注模型。通过蛋白免疫印迹法对不同实验组小鼠白质区域髓鞘相关蛋白进行半定量。通过免疫荧光染色技术观察各实验组小鼠白质少突胶质细胞的增殖分化改变和郎飞氏结相关结构的改变情况。结果:在BCAS模型中,低灌注条件下可以导致小鼠脑白质脱髓鞘改变,白指处成熟少突胶质细胞减少。敲除星形胶质细胞cx43后,可以减轻髓鞘脱失的程度,成熟少突胶质细胞减少降低,减轻轴突郎飞氏结结构的改变,并促使增殖的少突前体细胞分化成熟。结论:敲除星形胶质细胞cx43可以减轻低灌注导致的小鼠脑白质损伤,有一定的神经保护作用。目的:在研究特异性调控星形胶质细胞Cx43对脑白质低灌注损伤的影响基础上,探索该缝隙连接通道通讯在深部脑白质低灌注性损伤的机制。方法:利用微透析的方法,透析不同实验组小鼠白质部位细胞间隙各种小分子成分,通过荧光化学和电化学的方法检测各组小鼠透析液中小分子:乳酸、谷氨酸、腺苷的变化;通过离体核磁技术,检测了各组小鼠胼胝体部位各种代谢产物的变化情况。结果:在生理情况下,特异性敲除星形胶质细胞缝隙连接蛋白Cx43对小鼠的脑白质微环境中并没有明显影响;在脑白质低灌注损伤第3天,Cx43lox/lox小鼠脑组织内的腺苷、乳酸和谷氨酸出现明显上升,而在GFAP Cre-Cx43lox/lox小鼠脑组织内保持低平状态,其中谷氨酸和乳酸的结果具有统计学意义;一个月时,各种小分子水平逐渐恢复到正常水平。在离体核磁的检测中,正常情况下,敲除星形胶质细胞cx43对小鼠无明显影响;当低灌注三天时,GFAP Cre-Cx43lox/lox小鼠分泌的谷氨酸明显较其同窝对照组分泌少,且具有统计学意义;而低灌注一个月时,二者并无明显差别。结论:特异性敲除星形胶质细胞的缝隙连接蛋白Cx43,在正常情况下,对小鼠脑白质并无明显影响,在低灌注条件下,具有保护小鼠脑白质微环境稳定的作用
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