【摘 要】
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目的:
本课题以兔椎间盘髓核细胞为研究对象,并用IL-1β对髓核细胞进行诱导。后测定髓核细胞中iNOS及MMP-2、3的表达,探讨不同浓度的乌司他丁对白介素-1β诱导的兔腰椎
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目的:
本课题以兔椎间盘髓核细胞为研究对象,并用IL-1β对髓核细胞进行诱导。后测定髓核细胞中iNOS及MMP-2、3的表达,探讨不同浓度的乌司他丁对白介素-1β诱导的兔腰椎间盘髓核细胞中iNOS及MMP-2、3表达的影响,为乌司他丁运用于临床缓解椎间盘退变以及退变所导致的疼痛等提供了一定思路。
方法:
用酶消化法提取兔椎间盘髓核细胞并进行体外培养;用HE染色法及Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色法对兔椎间盘髓核细胞进行鉴定;将兔髓核细胞随机分为6组:正常对照组、乌司他丁对照组(加入320U/ml乌司他丁)、白介素1β诱导组(加入10ng/ml IL-1β)和3个不同浓度乌司他丁抑制组(加入IL-1β的同时,分别加入160U/ml、320U/ml和640U/ml乌司他丁)。作用48h后用细胞免疫组化法检测各组细胞中MMP-2、3表达变化,并用分光光度法检测各组培养液中iNOS活性。
结果:
HE染色及Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色法表明所提取细胞为正常兔椎间盘髓核细胞。细胞免疫组化检测提示正常对照组对iNOS及MMP-2、3的表达呈弱阳性,乌司他丁对照组与正常组相比表达有下降:诱导组iNOS及MMP-2、3的表达呈强阳性;各抑制组MMP-2、3表达均低于诱导组(P＜0.01),且其表达降低的程度与药物的处理浓度呈正比;各抑制组iNOS含量均低于诱导组,以320U/ml抑制组最显著(P＜0.01)。
结论:
在体外条件下,一定浓度的乌司他丁能够抑制IL-1β诱发的椎间盘细胞中MMP-2、3及iNOS的表达及其含量的增加,减少对蛋白多糖及胶原的降解。
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