本文系统讨论了土壤中Cu²⁺、Cd²⁺添加量对饭豆根瘤菌JMC1402P的腐生存活及共生固氮能力的影响，另外还探讨、比较了几种从土壤中直接抽提的微生物总DNA的纯化方法。 YMA培养基平板培养结果表明：Cu²⁺、Cd²⁺对JMC1402P的半致死浓度分别为8.05μg／mL和7.82μg／mL，JMC1402P可以在Cu²⁺或Cd²⁺含量为12.5μg／mL的平板上生长。YMA液体培养结果表明：当液体培养基中Cu²⁺浓度达到1μg／mL或Cd²⁺浓度达0.1μg／mL时已对JMC1402P的生长产生轻微的抑制作用，当Cu²⁺浓度达到10μg／mL或Cd²⁺浓度达2μg／mL时，JMC1402P已不能生长。 腐生存活试验结果表明：土壤中Cu²⁺添加量为20mg／Kg及40mg／Kg时对JMC1402P的腐生存活没有显著影响，Cu²⁺添加量达80mg／Kg时，已对JMC1402P产生了生理毒性。在灭菌土壤中Cu²⁺添加量小于200mg／Kg时，JMC1402P数量在37d后能保持在1.74×10⁵cfu／g土以上，当土壤中Cu²⁺添加量达到500mg／Kg时，在接种后第2d其数量已降至10²cfu／g土以下。在未灭菌土壤中，当Cu²⁺添加量在0～80mg／Kg范围内时，JMC1402P的数量在接种后23d已由10⁸cfu／g土降至10⁴～10⁵cfu／g土，随着Cu²⁺添加量的进一步增大，其菌数迅速下降到10⁴cfu／g土以下。 土壤中Cd²⁺添加量为3mg／Kg时对JMC1402P的腐生存活没有显著影响，Cd²⁺添加量达20mg／Kg时，已对JMC1402P产生了生理毒性。在灭菌土壤中Cd²⁺添加量为100mg／Kg及200mg／Kg处理组，在接种后的第9d其活菌数已降至10⁵cfu／g土以下，在接种后的第37d其活菌数分别只有2.05×10⁵cfu／g土及2.08×10⁴cfu／g土。在未灭菌土壤中，当Cd²⁺添加量在0～3mg／Kg范围内时，JMC1402P的数量在接种后23d也由10⁸cfu／g土降至10⁴～10⁵cfu／g土，Cd²⁺添加量为100mg／Kg和200mg／Kg时，JMC1402P的数量急剧降低，分别于第16d和第5d降至10⁴cfu／g土以下。 饭豆盆栽试验结果表明：Cu²⁺添加量在0～80mg／Kg范围内对JMC1402P共生固氮能力的影响并不大，当土壤中Cu²⁺添加量达到120mg／Kg时，对JMC1402P产生较明显的生理毒性，当Cu²⁺添加量达到300mg／Kg时，JMC1402P失去结瘤能力。土壤中添加3mg／Kg的Cd²⁺对饭豆根瘤菌的结瘤和共生固氮能力没有影响，土壤中的Cd²⁺添加量达到20mg／Kg时，每株根瘤数、每株根瘤重以及不管接种JMC1402P与否的饭豆植株地上部分干重与没有添加Cd²⁺的对照组相比在1％水平上表现出了极显著差异，但此时每克根瘤的固氮酶活没有表现出显著差异，当土壤中Cd²⁺添加量达到50mg／Kg时，对JMC1402P的共生固氮能力产生较明显的抑华中农业大学2004年硕士论文制作用。 对不同Ctlz十、Cd2+添加量的灭菌土壤中营腐生生活37d分离的JMC1402P进行质粒快检及砂培回接试验。质粒快检结果表明JMC 1402P在Cu2+添加量不大于斗00 mg/Kg或cd2+添加量不大于Zoom眯g时，营腐生生活37d没有出现大质粒丢失情况;砂培回接试验结果表明，从含重金属土壤中分离的JMCI 402P的结瘤及共生固氮能力与对照相比没有显著差异。 四种从土壤中直接抽提的微生物总DNA的纯化方法的比较结果显示:l%的琼脂糖凝胶电泳纯化方法及葡聚糖凝胶G一200离心层析纯化方法均不能完全纯化从土壤中抽提的微生物总DNA。若将直接抽提的总DNA先经葡聚糖凝胶G-Zoo离心层析纯化，再用1%的琼脂糖凝胶电泳纯化，则能取得较好的纯化效果。用含2%PVP的1%琼脂糖凝胶电泳纯化，再用DNA凝胶回收试剂盒回收后没有得到纯化后的上壤微生物总DNA。