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胆囊癌是胆道系统最常见的恶性肿瘤，约占全部胆道恶性肿瘤的64.7％。近年来调查显示，我国大部分地区胆囊癌发病率呈递增趋势。胆囊癌的自然预后极差，5年生存率低于5％。目前临床上主要以手术治疗为主，其预后与肿瘤的恶性程度及手术方式相关。肿瘤的临床病理分期仍是目前评估胆囊癌恶性程度、预测其预后的最常用指标。但是由于肿瘤的生物学异质性，单以临床病理分期来评估预后有一定的局限性。近年研究表明，肿瘤是多因素、多阶段、多基因变化所致的细胞失控性生长的一类细胞周期性疾病，细胞周期失控是细胞周期增殖失控而导致癌变的重要原因。参与细胞周期调控的分子有细胞周期蛋白（cyclin）、细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）和CDK抑制蛋白（CDKI）．细胞周期的不同时相由不同的调节因子控制，其中G1期的调节因子与癌变的关系最为密切。P27是近年来发现的一个重要的CDKI，主要通过抑制G1期的Cyclin-CDK的活性，使细胞停滞于G1期。有研究表明P27表达下降与多种肿瘤的发生和发展有关，并且可以作为一个独立的预后指 浙江大学硕士学位论文标。CyclinD；基因是近年来提出的重要的原癌基因，其编码的CyclinD；蛋白在细胞周期G；侣的转换中发挥重要的正性调控作用，与肿瘤的发生密切相关，在人类的多种恶性肿瘤中发现有CyclinD；的过表达。本研究应用免疫组织化学方法对sl例原发性胆囊癌进行P27、CyclinD；蛋白表达水平检测，并探讨它们与胆囊癌患者的预后及临床病理参数之间的关系。 材料与方法 选取浙江大学医学院附属邵逸夫医院1994年8月至2000年12月期间手术切除的原发性胆囊癌组织标本共51例。其中男性19例，女性 32例，年龄自 31—82岁，平均年龄 64．l岁。手术方式为：单纯胆囊切除术13例，根治性胆囊癌切除术17例，扩大胆囊癌根治术2例，姑息性胆囊癌切除术19例。所有标本均经病理学证实，按UICC关于原发性胆囊癌的临床病理TMN分期标准进行分期：其中1期4例，11期10例，Ill期11例，IV期26例。用作对照的12例胆囊腺瘤标本和10例慢性胆囊炎标本取自我院腹腔镜胆囊切除术的病人。 随访资料：通过电话调查，结合入户调查的方式了解sl例胆囊癌患者自手术之日起 1年内的生存情况。51例患者中 2例失访，49例有完整随访资料。存活1年以上的有20例，一年内死于肿瘤的有29例。一年生存率为40．8％。 采用免疫组化Efl VISIOn二步法检测p27‘”’和CyCliflD；的表达，一抗工作浓度均为1：50，设立阴性和阳性对照。染色阳性结果判断：二者均以细胞核或胞核伴有胞浆呈棕黄色作为阳性细胞，阳性细胞比例超过盼作为判断 P27“…和 CyclinD；蛋白表达阳性的标推。 2 浙江大学硕士学位论文所有数据处理皆采用SPSS for Windo。s软件包进行统计分析，其中大样本计数资料统计采用卡方检验，小样本资料采用确切概率法，多因素回归分析采用C。X模型。 结果与讨论 sl例胆囊癌中P27阳性表达者17例，阳性率为33．3％，较慢性胆囊炎明显降低，具有统计学差异（P＜0．05）：网7蛋白的表达与胆囊癌患者的年龄、性别及组织学类型无相关性（P＞0．05）；有淋巴结转移组较无淋巴结转移组表达阳性明显下降，差别有统计学意义 （P＜0．05）；其表达与胆囊癌患者临床 TNM分期也具有相关性，随着肿瘤分期的进展，其表达阳性率也逐渐下降，差异有统计学意义 （NVS，P＜0．of山IVSI，P＜0．05）．上述结果亦表示，P27蛋白的表达下降与胆囊癌的转移和进展密切相关，可能是胆囊癌发生、发展和转移的重要原因之一。PZ 7表达低下与淋巴结转移有关，与临床分期呈负相关，提示其为预后不良的标志。 sl例胆囊癌中CyCliCDI阳性表达者27例，阳性率为52．9％，胆囊腺瘤中的表达为66．7％，而在慢性胆囊炎中基本不表达，提示CyclinD；表达升高可能是胆囊癌发生机理中的早期事件。对于在胆囊腺瘤中的表达较胆囊癌中表达升高这一现象，考虑以下机理：CyclinD；过表达可能仅在胆囊癌早期胆囊上皮细胞转换过程中出现，一旦转换成功便逐渐下降：另外，胆囊癌的致癌机理有多种途径，而CyCliflDI可能仅参与腺瘤癌变的过程，而未参与其他致癌途径。CyclinD；表达与胆囊癌患者性别、年龄、组织学类型、淋巴结转移和临床TNM分期均无相关性，表明CyCliflDI可能不参与胆囊癌的进展。 3 浙江大学硕士学位论文 对于P27蛋白表达与CyGliGDI的表达之间的关系，文献报道在 不同的肿瘤中其结果不尽相同。本组研究表明P27 蛋白表达与 CyCliCDI的表达呈负相关。 结 论1．p27的表达下降、Cy