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胆囊癌是胆道系统最常见的恶性肿瘤,约占全部胆道恶性肿瘤的64.7%。近年来调查显示,我国大部分地区胆囊癌发病率呈递增趋势。胆囊癌的自然预后极差,5年生存率低于5%。目前临床上主要以手术治疗为主,其预后与肿瘤的恶性程度及手术方式相关。肿瘤的临床病理分期仍是目前评估胆囊癌恶性程度、预测其预后的最常用指标。但是由于肿瘤的生物学异质性,单以临床病理分期来评估预后有一定的局限性。近年研究表明,肿瘤是多因素、多阶段、多基因变化所致的细胞失控性生长的一类细胞周期性疾病,细胞周期失控是细胞周期增殖失控而导致癌变的重要原因。参与细胞周期调控的分子有细胞周期蛋白(cyclin)、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)和CDK抑制蛋白(CDKI).细胞周期的不同时相由不同的调节因子控制,其中G1期的调节因子与癌变的关系最为密切。P27是近年来发现的一个重要的CDKI,主要通过抑制G1期的Cyclin-CDK的活性,使细胞停滞于G1期。有研究表明P27表达下降与多种肿瘤的发生和发展有关,并且可以作为一个独立的预后指 浙江大学硕士学位论文标。CyclinD;基因是近年来提出的重要的原癌基因,其编码的CyclinD;蛋白在细胞周期G;侣的转换中发挥重要的正性调控作用,与肿瘤的发生密切相关,在人类的多种恶性肿瘤中发现有CyclinD;的过表达。本研究应用免疫组织化学方法对sl例原发性胆囊癌进行P27、CyclinD;蛋白表达水平检测,并探讨它们与胆囊癌患者的预后及临床病理参数之间的关系。 材料与方法 选取浙江大学医学院附属邵逸夫医院1994年8月至2000年12月期间手术切除的原发性胆囊癌组织标本共51例。其中男性19例,女性 32例,年龄自 31—82岁,平均年龄 64.l岁。手术方式为:单纯胆囊切除术13例,根治性胆囊癌切除术17例,扩大胆囊癌根治术2例,姑息性胆囊癌切除术19例。所有标本均经病理学证实,按UICC关于原发性胆囊癌的临床病理TMN分期标准进行分期:其中1期4例,11期10例,Ill期11例,IV期26例。用作对照的12例胆囊腺瘤标本和10例慢性胆囊炎标本取自我院腹腔镜胆囊切除术的病人。 随访资料:通过电话调查,结合入户调查的方式了解sl例胆囊癌患者自手术之日起 1年内的生存情况。51例患者中 2例失访,49例有完整随访资料。存活1年以上的有20例,一年内死于肿瘤的有29例。一年生存率为40.8%。 采用免疫组化Efl VISIOn二步法检测p27‘”’和CyCliflD;的表达,一抗工作浓度均为1:50,设立阴性和阳性对照。染色阳性结果判断:二者均以细胞核或胞核伴有胞浆呈棕黄色作为阳性细胞,阳性细胞比例超过盼作为判断 P27“…和 CyclinD;蛋白表达阳性的标推。 2 浙江大学硕士学位论文所有数据处理皆采用SPSS for Windo。s软件包进行统计分析,其中大样本计数资料统计采用卡方检验,小样本资料采用确切概率法,多因素回归分析采用C。X模型。 结果与讨论 sl例胆囊癌中P27阳性表达者17例,阳性率为33.3%,较慢性胆囊炎明显降低,具有统计学差异(P<0.05):网7蛋白的表达与胆囊癌患者的年龄、性别及组织学类型无相关性(P>0.05);有淋巴结转移组较无淋巴结转移组表达阳性明显下降,差别有统计学意义 (P<0.05);其表达与胆囊癌患者临床 TNM分期也具有相关性,随着肿瘤分期的进展,其表达阳性率也逐渐下降,差异有统计学意义 (NVS,P<0.of山IVSI,P<0.05).上述结果亦表示,P27蛋白的表达下降与胆囊癌的转移和进展密切相关,可能是胆囊癌发生、发展和转移的重要原因之一。PZ 7表达低下与淋巴结转移有关,与临床分期呈负相关,提示其为预后不良的标志。 sl例胆囊癌中CyCliCDI阳性表达者27例,阳性率为52.9%,胆囊腺瘤中的表达为66.7%,而在慢性胆囊炎中基本不表达,提示CyclinD;表达升高可能是胆囊癌发生机理中的早期事件。对于在胆囊腺瘤中的表达较胆囊癌中表达升高这一现象,考虑以下机理:CyclinD;过表达可能仅在胆囊癌早期胆囊上皮细胞转换过程中出现,一旦转换成功便逐渐下降:另外,胆囊癌的致癌机理有多种途径,而CyCliflDI可能仅参与腺瘤癌变的过程,而未参与其他致癌途径。CyclinD;表达与胆囊癌患者性别、年龄、组织学类型、淋巴结转移和临床TNM分期均无相关性,表明CyCliflDI可能不参与胆囊癌的进展。 3 浙江大学硕士学位论文 对于P27蛋白表达与CyGliGDI的表达之间的关系,文献报道在 不同的肿瘤中其结果不尽相同。本组研究表明P27 蛋白表达与 CyCliCDI的表达呈负相关。 结 论1.p27的表达下降、Cy