乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)感染引起的一种常见的、严重的肝脏疾病。尽管一些抗病毒药物如拉米夫定(Lamivudine，3TC)、阿德福韦酯(Adefovir, ADV)等能够有效的抑制乙肝病毒复制，慢性乙肝仍然是一种无法彻底治愈的疾病。目前，在抗乙肝病毒治疗中核苷类药物起着关键作用。但是，长期使用会产生耐药和毒副作用，这可能导致治疗失败、肝脏疾病的发展。因此，寻找疗效显著、低毒副作用的新型抗HBV药物仍然具有重要意义。鸭乙型肝炎(Duck hepatitis B virus，DHBV)模型是目前国内外公认的一种评价抗HBV药物的体内动物模型。本文首先建立了河南地区后天感染麻鸭乙肝病毒模型，然后采用HepG2.2.15细胞为体外模型，评价新型核苷类药物α-DDB-DU的体外抗病毒活性;采用建立的鸭乙肝模型为体内模型，评价α-DDB-DU的体内抗病毒活性及保肝作用。　　 第一部分:后天感染河南麻鸭乙肝病毒模型的建立。　　 目的:建立河南麻鸭乙型肝炎病毒标准模型，并初步观察拉米夫定(3TC)体内抗DHBV作用。　　 方法:筛选3日龄DHBV阴性河南麻鸭，经胫静脉注射DHBV阳性血清，连续观察42天，采用荧光定量聚合酶链式反应(fluorsescence quantitative polymerase chainreaction，FQ-PCR)检测鸭血清和肝脏中DHBV DNA变化情况。随后用3TC对建立的模型进行初步应用。模型组给予生理盐水2ml/kg·d，3TC组给予3TC20mg/kg·d，连续给药10天。FQ-PCR检测给药后5天、10天及停药后3天血清和肝脏中DHBV DNA抑制率，并进行肝脏病理学观察。　　 结果:感染2d后，血清和肝脏中均可检测到DHBV DNA。血清第14天达到高峰，肝脏第21天达到高峰，在42天内均维持较高的DHBV DNA水平。3TC用药10天后，血清和肝脏HBV DNA抑制率分别为86.47％和84.92％，肝组织炎性病变较模型组明显减轻，但停药3天有轻度“反跳”现象。　　 结论:河南麻鸭后天感染DHBV较敏感，病毒在体内增殖稳定，是DHBV感染的理想疾病模型，该模型可用于抗HBV药物的筛选和评价。　　 第二部分:新型核苷-联苯双酯化合物α-DDB-DU抗HBV作用研究。　　 目的:探讨新型核苷类化合物α-DDB-DU体内和体外抗乙肝病毒作用。　　 方法:α-DDB-DU体外抗病毒活性的研究选用能够合成、分泌HBV颗粒和表达HBV抗原标志物的HepG2.2.15细胞株为模型，采用MTT法检测不同浓度α-DDB-DU的细胞毒性;酶联免疫吸附法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA)检测不同浓度α-DDB-DU对细胞上清中HBsAg和HBeAg的抑制作用;FQ-PCR法检测α-DDB-DU对细胞内外HBV DNA水平的抑制作用。体内抗病毒活性的研究采用已建立的后天感染河南麻鸭乙肝病毒模型。感染后，DHBV阳性鸭随机分成5组，药物组给予不同剂量的α-DDB-DU（0.8、4和20 mg/kg·d），阳性对照组给与3TC20mg/kg·d，模型组与阴性对照组给予生理盐水2ml/kg·d，连续给药10天。在第5、10和停药后第3天，收集血清和肝组织样品，检测血清和肝脏中DHBV DNA及ALT(Alanine Aminotransferase)、AST(Aspartate Amintransferase)的水平。用药10天后，对肝脏进行组织病理学观察。　　 结果:α-DDB-DU对HepG2.2.15的半数毒性浓度(CC50)为436.16μM。不同浓度的该化合物（0.2μM、1μM、5μM）作用于细胞，能够显著的抑制s抗原和e抗原的分泌，抑制作用与时间和剂量呈正相关。α-DDB-DU浓度为5μM时，能够有效地抑制HBV DNA的复制。药物作用第九天，细胞内和细胞外DHBV DNA抑制率分别为81.18％和88.55％。给予不同剂量α-DDB-DU(0.8，4，20mg/kg·d)治疗感染DHBV的鸭子，能够显著抑制DHBV DNA的复制。给药10天，鸭血清和肝脏中DHBV DNA的抑制率分别达到93.75％和89.43％。此外，血清和肝脏中ALT、AST水平显著下降，鸭肝脏的组织病理学结果表明α-DDB-DU对肝组织有明显改善作用。　　 结论:α-DDB-DU对HBV的复制具有较强的抑制活性，并且对肝组织病理学具有显著地改善作用。